Dissezione della ghiandola linfatica larvale: isolamento dell'organo produttore di emociti della Drosophila

In questo articolo

Abstract

Fonte: Reimels, T. A. e Pfleger, C. M. Metodi per esaminare la ghiandola linfatica e gli emociti nelle larve di Drosophila. J. Vis. Exp. (2016).

Questo video descrive la ghiandola linfatica di Drosophila, il sito primario dell'emopoiesi nella larva di mosca, e mostra un esempio di protocollo per sezionare e montare l'organo per l'immunoistochimica e l'imaging fluorescente.

Protocollo

Questo protocollo è un estratto da Reimels e Pfleger, Metodi per esaminare la ghiandola linfatica e gli emociti nelle larve di Drosophila, J. Vis. Exp. (2016).

1. Immunoistochimica delle ghiandole linfatiche larvali

NOTA: La ghiandola linfatica si trova a circa un terzo di lunghezza dall'estremità anteriore di una larva leggermente sotto il cervello sul lato dorsale. (Vedi freccia in Figura 1B.) La ghiandola linfatica fiancheggia il vaso dorsale ed è più facilmente sezionata attaccata ai ganci della bocca o al cervello. L....

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Risultati

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Figura 1: Melanizzazione delle cellule cristalline in vivo. A) Le larve sono state poste singolarmente in provette per PCR prima del riscaldamento. Le frecce rosse indicano le larve che non si trovano sul fondo dei tubi. B) Un tipico pattern di melanizzazione delle cellule cristalline dopo il riscaldamento, che a volte rivela la ghiandola linfatica (freccia; lato dorsale mostrat.......