Dissociazione a singola cellula di Caenorhabditis elegans: Un metodo per isolare le cellule vive
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Germania, E.M., et al. Isolamento di specifiche popolazioni neuronali da nematodi Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2019).
Questo video descrive un metodo per dissociare interi vermi in una sospensione a singola cellula adatta per FACS o immunoprecipitazione di cellule intatte.
Protocol
Questo protocollo è un estratto da Germany et al, Isolation of Specific Neuron Populations from Roundworm Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. 1. Preparazione e raccolta di vermi invecchiati per l’isolamento cellulare NOTA: Di seguito è spiegato l’isolamento dei neuroni colinergi…
Materials
| Agar, Molecular Biology Grade | VWR | A0930 | |
| CaCl2 | Sigma | C5670 | |
| Contess Automated Cell Counter | Invitrogen | Z359629 | |
| DTT | USBiological | D8070 | |
| FBS | Omega Scientific | FB-02 | |
| Fluorodeoxyuridine | Sigma | F0503 | |
| HEPES | Sigma | H3375 | |
| KCl | Amresco | O395 | |
| KH2PO4 | USBiological | P5110 | |
| Leibovitz's L-15 Medium | Gibco | 21083027 | |
| MgCl2 | Sigma | M8266 | |
| MgSO4 | USBiological | M2090 | |
| Na2HPO4·7H2O | USBiological | S5199 | |
| NaCl | VWR | X190 | |
| NaOCl (Bleach) | Clorox | ||
| Penicillin-Streptomicen | Fisher Scientific | 15140122 | |
| Pronase E | Sigma | 7433 | protease mixture from Streptomyces griseus |
| SDS | Amresco | O227 | |
| SMT1-FLQC fluorescence stereomicroscope | Tritech Research | ||
| Sucrose | USBiological | S8010 |
Citazione di questo articolo
Single Cell Dissociation of Caenorhabditis elegans: A Method to Isolate Live Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20135, doi: (2023).