Enkelcellsdisociation av Caenorhabditis elegans: En metod för att isolera levande celler
Published: April 30, 2023
Abstract
Källa: Tyskland, E.M., m.fl. Isolering av specifika neuronpopulationer från Roundworm Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2019).
Denna video beskriver en metod för att skilja hela maskar till en encellig suspension lämplig för FACS eller immunprecipitation av intakta celler.
Protocol
Detta protokoll är ett utdrag från Tyskland et al, Isolering av specifika neuronpopulationer från Roundworm Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Förberedelse och insamling av åldrade maskar för cellisolering OBS: Nedan förklaras isoleringen av kolinerga nervceller…
Materials
| Agar, Molecular Biology Grade | VWR | A0930 | |
| CaCl2 | Sigma | C5670 | |
| Contess Automated Cell Counter | Invitrogen | Z359629 | |
| DTT | USBiological | D8070 | |
| FBS | Omega Scientific | FB-02 | |
| Fluorodeoxyuridine | Sigma | F0503 | |
| HEPES | Sigma | H3375 | |
| KCl | Amresco | O395 | |
| KH2PO4 | USBiological | P5110 | |
| Leibovitz's L-15 Medium | Gibco | 21083027 | |
| MgCl2 | Sigma | M8266 | |
| MgSO4 | USBiological | M2090 | |
| Na2HPO4·7H2O | USBiological | S5199 | |
| NaCl | VWR | X190 | |
| NaOCl (Bleach) | Clorox | ||
| Penicillin-Streptomicen | Fisher Scientific | 15140122 | |
| Pronase E | Sigma | 7433 | protease mixture from Streptomyces griseus |
| SDS | Amresco | O227 | |
| SMT1-FLQC fluorescence stereomicroscope | Tritech Research | ||
| Sucrose | USBiological | S8010 |
Citazione di questo articolo
Single Cell Dissociation of Caenorhabditis elegans: A Method to Isolate Live Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20135, doi: (2023).