Drosophila (olika betydelser) Y-labyrintanalys: En metod för att bedöma luktsvar i flugor

Abstract

Källa: Simonnet, M.M., et al. Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay. J. Vis. Exp. (2014).

Denna video beskriver en metod för att testa lukt undersökande beteende i fruktflugan, kallad Y-labyrinten. Det presenterade protokollklippet visar hur du ställer in och utför analysen.

Protocol

Denna protokolltext är ett utdrag från Simonnet et al., Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay, J. Vis. Exp. (2014). 1. Innan du börjar Använd ett isogeniserat referenslager med stabila och robusta beteendemässiga fenotyper. Det finns ingen allmän regel för att välja detta lager, eftersom alla potentiella kontroller kan bära heterogena bakgrunds alleler. Använd denna kontrollstam för att backcross alla andra lager som behövs…

Representative Results

Figur 1: Manligt luktsvar bedömt med en Y-labyrintuppsättning. A) Delad enhet. B) Monterad enhet. C) Uppsättning i arbetsskick under vitt rött ljus. D) Kvantifiering av manliga luktsvar mot ättiksyra (AA) eller fenylacetikasyra (PAA) som båda späds ut i destillerat vatten (10 % v/v) (N = 11, vilket motsvarar totalt 110 flugor). Statistisk analys ut…

Materials

Drosophila Polystyrene tube	VWR europe	734-2255	30 x 25 mm Y-maze
Drosophila Borosilicate tube	Dijon verre		95 X 25 mm Y-maze
Foam stopper	Dutscher	999038	Y-maze
Y-shaped connector	Europrix	11020605	Y-maze
100-1,000 µl pipette tips	Corning	4868	Join the following pipette tips to the Y-shaped connector. Cut 2 pipette tips at 65 mm from the wide end, and connect the narrow end (with a ~2 mm opening) to 2 test vials. These openings will limit the U-turns once the flies enter the tubes containing the odors. Cut 1 pipette tip at 35 mm from the wide end, and connect it to the loading vial.
Far-Red LED Bulb	Rubin-Lacaque	0RB180238	625-630 nm
Acetic Acid	Sigma-Aldrich	45725
Phenylacetic Acid	Sigma-Aldrich	P16621
Yeast	Sensient Flavors Strasbourg	1018880464
Cornmeal	eurogerm	Farine de maïs
Agar	Kalys	HP-697-25
Methyl hydroxy 4 benzoate	VWR international	25605293