Ensaio de captura de presas: um método para estudar o comportamento de captura de presas da larva de zebrafish

Abstract

Fonte: Muto, A., et al. Ablação de uma população neuronal usando um laser de dois fótons e sua avaliação usando imagem de cálcio e gravação comportamental em larvas de zebrafish.  J. Vis. Exp. (2018)

Este vídeo descreve o ensaio de captura de presas. O vídeo discute o método para estudar o comportamento de captura de presas de larvas de zebrafish após a ablação a laser de neurônios específicos.

Protocol

1. Avaliação das Consequências Comportamentais Após a Ablação a Laser Configure um sistema de gravação comportamental que consiste em um estereoscópio equipado com uma câmera de vídeo. Use uma câmera com um software de aquisição de imagem adequado, comercial ou personalizado(Figura 1A). Otimize a condição de iluminação para que o paramecium possa ser detectado pelo processamento da imagem. Por exemplo, use uma luz LED branca de anel com um espaçador…

Representative Results

Figura 1. Teste de captura de presas e dados representativos em larvas de zebrafish a laser. (A) Sistema de gravação comportamental. O estereóquio estava equipado com uma câmera CMOS. As imagens foram adquiridas usando um script personalizado. (B) Componentes do sistema de iluminação. Um papel de cor cinza, um difusor de vidro, luz branca de anel led, difusor, um espaçador persona…

Materials

Imageing Chambers	Grace Bio-Labs	CoverWell Imaging Chambers PCIA-2.5	Used as a behavioral recording chamber
ORCA-Flash4.0	Hamamatsu Photonics	Model:C11440-22CU	A scientific CMOS camera
SZX7	Olympus		Stereoscope
A ring LED light	CCS	Model: LDR2-100SW2-LA	White LED
Secure-Seal Hybridization Chamber Gasket, 8 chambers, 9 mm diameter x 0.8 mm depth	Molecular Probes	Catalogue # S-24732	Used as a recording chamber in Ca imaging