Prey Capture Assay: een methode om het prooivangstgedrag van zebravislarven te bestuderen

Abstract

Bron: Muto, A., et al. Ablatie van een neuronale populatie met behulp van een laser met twee foton en de beoordeling ervan met behulp van calciumbeeldvorming en gedragsregistratie bij zebravislarven.  J.Vis. Exp. (2018)

Deze video beschrijft de prooivangsttest. De video bespreekt de methode om het vangstgedrag van prooidieren van zebravislarven te bestuderen na de laserablatie van specifieke neuronen.

Protocol

1. Beoordeling van gedragsgevolgen na laserablatie Stel een gedragsopnamesysteem in dat bestaat uit een stereoscope die is uitgerust met een videocamera. Gebruik een camera met de juiste beeldverwervingssoftware, commercieel of op maat gemaakt (figuur 1A). Optimaliseer de lichtconditie zodat het paramecium kan worden gedetecteerd door beeldverwerking. Gebruik bijvoorbeeld een ringwit LED-lampje met een afstandsbalk (Afbeelding 1B).Opmerking:</stro…

Representative Results

Figuur 1. Prooien vangen assay en representatieve gegevens in laser-ablated zebravislarven. (A) Gedragsregistratiesysteem. De stereomicroscoop was uitgerust met een CMOS camera. Afbeeldingen zijn verkregen met behulp van een op maat gemaakt script. (B) Onderdelen van het verlichtingssysteem. Een grijs gekleurd papier, een glazen diffuser, witte LED-ringlamp, diffuser, een op maat gemaakt…

Materials

Imageing Chambers	Grace Bio-Labs	CoverWell Imaging Chambers PCIA-2.5	Used as a behavioral recording chamber
ORCA-Flash4.0	Hamamatsu Photonics	Model:C11440-22CU	A scientific CMOS camera
SZX7	Olympus		Stereoscope
A ring LED light	CCS	Model: LDR2-100SW2-LA	White LED
Secure-Seal Hybridization Chamber Gasket, 8 chambers, 9 mm diameter x 0.8 mm depth	Molecular Probes	Catalogue # S-24732	Used as a recording chamber in Ca imaging