Prey Capture Assay: En metode til at studere Prey Capture Behavior af zebrafisk Larva

Abstract

Kilde: Muto, A., et al. Ablation af en neuronal population ved hjælp af en to-foton laser og dens vurdering ved hjælp af calciumbilleddannelse og adfærdsregistrering i zebrafisklarver.  J. Vis. Exp. (2018)

Denne video beskriver bytte fange assay. Videoen diskuterer metoden til at studere byttefangstadfærd hos zebrafisklarver efter laserabsationen af specifikke neuroner.

Protocol

1. Vurdering af adfærdsmæssige konsekvenser Efter Laser Ablation Opret et adfærdsoptagelsessystem, der består af et stereoskop udstyret med et videokamera. Brug et kamera med en passende billedopsamlingssoftware, kommerciel eller specialfremstillet (Figur 1A). Optimer belysningstilstanden, så parameciumet kan detekteres ved billedbehandling. Brug f.eks. et ringhvid LED-lys med en afstandsstykke (Figur 1B).Bemærk: Afstanden fra og v…

Representative Results

Figur 1. Prey fange assay og repræsentative data i laser-ablated zebrafisk larver. (A) Adfærdsregistreringssystem. Stereomikroskopet var udstyret med et CMOS-kamera. Billeder blev anskaffet ved hjælp af et specialfremstillet script. (B) Belysningssystemets komponenter. Et gråfarvet papir, en glasdiffusor, hvidt LED-ringlys, diffusor, en specialfremstillet afstandsstykke (pap) og diff…

Materials

Imageing Chambers	Grace Bio-Labs	CoverWell Imaging Chambers PCIA-2.5	Used as a behavioral recording chamber
ORCA-Flash4.0	Hamamatsu Photonics	Model:C11440-22CU	A scientific CMOS camera
SZX7	Olympus		Stereoscope
A ring LED light	CCS	Model: LDR2-100SW2-LA	White LED
Secure-Seal Hybridization Chamber Gasket, 8 chambers, 9 mm diameter x 0.8 mm depth	Molecular Probes	Catalogue # S-24732	Used as a recording chamber in Ca imaging