꼬리 클립에서 DNA 추출 : 제브라 피시 Genotyping에 사용되는 방법

Abstract

출처: 싱 L., 외. 고해상도 용융 해석을 통해 PCR을 사용하는 빠르고 효율적인 Zebrafish Genotyping. J. 비스 익스펙. (2014).

이 문서에서는 제브라피시 꼬리 클립의 DNA 추출에 대해 설명합니다. 이 프로토콜은 제브라피시 유전자형을 분석하는 신속하고 효율적인 방법을 보여줍니다.

Protocol

1. DNA 준비 DNA 용해 완충제 준비: 50 mM KCl, 10 mM Tris-HCl pH 8.3, 0.3% Tween 20, 0.3% NP40. 신선한 Proteinase K를 사용 당일 1 mg/ml의 최종 농도에 추가합니다. 조직 수집: 성인 생선 지느러미 클립의 경우: 생선 마취: 물고기를 0.004% MS-222(트리카인) 용액에 놓습니다. 아가미 운동이 느려질 때까지 기다립니다. 5-10 김스 와이프의 스택에 물고기를 넣고 멸균 면도날로 약 2-3mm의 꼬?…

Materials

100 Reaction LightScanner Master Mix	BioFire	HRLS-ASY-0002	www.biofiredx.com
Tricaine
Paraformaldehyde