Overview
这段视频描述了 体内 电波,这是一种将DNA输送到成年斑马鱼的显性分子细胞的技术。
Protocol
1. 电镀
- 将鱼从注射设置中取出,同时仍将其放在海绵中。
- 将电极尖端的内侧浸入超声波凝胶中。
- 用少量超声波凝胶盖住鱼的端粒。
- 将鱼头放置在电极之间,将正电极放在鱼头的腹侧,将负电极放在后侧(图1C),同时将鱼体放在海绵中。这为位于辅助课区的电聚特性电聚物胶质设定了电流的流动方向。
- 轻轻和精确地按压电极对端粒 (图 1 C)。使用脚踏板管理电流。将电极保持到位,直到所有五个脉冲完成。
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Representative Results
图1:恒化斑马鱼端粒的日冕部分的示意图表示。(A) 斑马鱼脑膜冠状部分的方案,突出显眼细胞的位置,这些细胞衬砌心室表面并建造心室壁。多萨尔前体层正在连接两个半球,并覆盖心室(V),位于两个细胞层之间:ependymoglial和 ependymal。(B) 左边是斑马鱼头的照片,上面是一条白色的虚线,突出了斑马龙的位置。玻璃毛细毛被描绘为红色,以及毛细毛插入的目标位置。右图是斑马鱼大脑的示意图,显示红色质粒注射的位置。需要注意的是,玻璃毛细丝不接触脑电图,质粒被注射到心室的脑电龙正上方。T=端粒体,OT=光构造。(C) 左边是斑马鱼头(侧视图)的照片,右边是头(侧视图)的描绘,显示电极的位置,以瞄准端粒。
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Ultrasound gel | SignaGel, Parker laboratories INC | 15-60 | Electrode Gel |
BTX Tweezertrodes Electrodes | Platinum Tweezertrode, BTX Harvard Apparatus | 45-0486 | 1mm diameter |
Electroporation device | BTX ECM830 Square Wave Electroporation System, BTX Harvard Apparatus | 45-0662 |