Dissezione cerebrale del pesce zebra: una tecnica di neurobiologia dei pesci

Abstract

Fonte: Lopez-Ramirez M. A. et. al., Isolamento e coltura delle neurosfere derivate dal cervello del pesce zebra adulto. J. Vis. Exp. (2016).

Questo video descrive la tecnica di microdissezione del cervello da un pesce zebra adulto. Questo metodo aiuta a ottenere neuorosfere derivate dall'intero cervello che possono essere studiate ulteriormente.

Protocollo

1. Dissezione del cervello adulto del pesce zebra

1. Preparare un letto di dissezione riempiendo una piastra di Petri da 100 mm x 15 mm con impacchi di ghiaccio in gel. Quindi posizionare il coperchio sulla capsula di Petri e incubare a -20 °C fino a quando il gel non si congela. Sopra il coperchio posizionare un quadrato di carta da filtro pulita e avvolgere sia la carta da filtro che la capsula di Petri con una pellicola di plastica.
2. Pulire e sterilizzare tutti gli strumenti di microdissezione con etanolo al 70% o calore prima di ogni utilizzo. Posizionare tutti gli strumenti di dissezione sterilizzati vicino al microscopio da dissezione e, subito....

Risultati

Figura 1: Differenziazione delle neurosfere derivate dal cervello del pesce zebra.(A-C, E) Immagini a contrasto di fase di neurosfere derivate da tutto il cervello coltivate nel mezzo di differenziazione Z durante 1 (A, DiVd1), 3 (B, DiVd3) e 4 (C e D, DiVd4) giorni. (E) Vista dorsale de.......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
DMEM/F12 1x	Tecnologie per la vita	Codice 11330-032
Penicillina-streptomicina	Tecnologie per la vita	Codice: 15140-122
Tricaina MS-222	sigma	Codice: A5040	soluzione madre da 4 mg/ml