Zebrafisch Gehirn-Sektion: Eine Technik der Fisch-Neurobiologie

Abstract

Quelle: Lopez-Ramirez M. A. et. al., Isolation and Culture of Adult Zebrafish Brain-derived Neurospheres. J. Vis. (2016).

Dieses Video beschreibt die Technik der Mikrodissektion des Gehirns von einem erwachsenen Zebrafisch. Diese Methode hilft bei der Gewinnung von ganzen Gehirn abgeleiteten Neuorosphären, die weiter untersucht werden können.

Protocol

1. Zerlegung des erwachsenen Zebrafisch-Gehirns Bereiten Sie ein Sezierbett vor, indem Sie eine 100 mm x 15 mm Petrischale mit Geleispackungen füllen. Dann den Deckel auf die Petrischale legen und bei -20 °C bebrüten, bis das Gel gefriert. Auf dem Deckel ein Quadrat aus sauberem Filterpapier aufstellen und sowohl das Filterpapier als auch die Petrischale mit Kunststofffolie umwickeln. Reinigen und sterilisieren Sie alle Mikrodissektionsinstrumente vor jedem Gebrauch um 70 % Ethanol oder Wärme. Ste…

Representative Results

Abbildung 1: Differenzierung von Zebrafischen, die aus dem Gehirn stammen, Neurosphären. (A-C, E) Phasenkontrastbilder ganzer hirnabgeleiteter Neurosphären, die im Z-Differenzierungsmedium während 1 (A, DiVd1), 3 (B, DiVd3) und 4 (C und D, DiVd4) Tagen kultiviert wurden. (E) Dorsale A…

Materials

DMEM/F12 1x	Life Technologies	11330-032
Penicillin-streptomycin	Life Technologies	15140-122
Tricaine MS-222	Sigma	A5040	stock solution of 4 mg/ml