Saggio di formazione della colonia di agar morbido: un metodo per testare gli effetti di nuovi composti sulla proliferazione delle cellule tumorali
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Horibata A. et al.,Utilizzo del saggio di formazione della colonia di agar morbido per identificare gli inibitori della tumorigenicità nelle cellule tumorali del seno. J. Vis. Exp.
Questo video descrive un saggio di formazione di colonie di agar morbido per testare gli effetti di un inibitore enzimatico PADI e BB-Cl-amidina sulla tumorigenicità del cancro al seno in vitro. Questo saggio consente anche la valutazione quantitativa del potenziale di trasformazione cellulare nel contesto delle perturbazioni genetiche.
Protocol
1. Preparazione del 3% 2-idrossietile Agarose In una bottiglia di vetro pulita e asciutta da 100 ml, aggiungere 0,9 g di agarosio 2-idrossietile (Agarosio VII) seguito da 30 ml di acqua distillata. Microonde la miscela per 15 secondi e ruotare delicatamente. Ripetere questo passaggio almeno altre tre volte fino a quando la polvere di agarosio si dissolve completamente. Autoclave il flacone contenente la soluzione per 15 min. Lasciare raffreddare la soluzione di agarosio in RT prima…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Zeiss Axiopot | Carl Zeiss Microscopy | 1021859251 | |
| Inverted Microscope | Olympus | CKX41 | |
| DMEM/F-12 | Lonza BioWhittaker | 12-719F | |
| HyClone Donor Equine Serum | Fisher Scientific | SH30074.03 | |
| Penicillin Streptomycin | Life Technologies | 15140-122 | |
| 2-Hydroxyethylagarose: Type VII, low gelling temperature | Sigma-Aldrich | 39346-81-1 |
Citazione di questo articolo
Soft Agar Colony Formation Assay: A Method to Test Effects of Novel Compounds on Cancer Cell Proliferation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20226, doi: (2023).