Denna video beskriver en teknik för att förbereda bröstcancer cell prover för metabolit profilering. Bröstcancerceller behandlas med estradiol, som binder till östrogenreceptorn alfa och orsakar förändring i metabolitsammansättningen.
Protocol
1. Metabolomisk analysprovberedning Cellkultur och behandling Frö 400 000 MCF7-celler per 10 cm platta i tillväxtmedium. För varje behandling bered tre prover. Använd två plattor i varje prov för att ta emot tillräckligt med celler för detektion. På dag 3, ta bort mediet och tillsätt 5 ml färskt medium med eller utan 10-8 M Estradiol eller E2 till cellerna. Behandla cellerna i 24 timmar (37 °C i fuktad 5% CO2-atmosfär). Exempelsamling Til…
Sample Preparation for Metabolomics: A Method to Prepare Cell Samples for Metabolite Profiling. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20227, doi: (2023).