परमाणु परिवहन के एकल अणु इमेजिंग
Summary
एकल अणु माइक्रोस्कोपी परमाणु परिवहन में उपन्यास अंतर्दृष्टि प्रदान approch.
Abstract
पिछले एक दशक से अधिक जैविक प्रतिक्रियाओं को समझने में एक महान लाभ उठाने के एकल अणु प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी दृष्टिकोण की उपयोगिता सिद्ध किया गया है. उच्च अस्थायी और स्थानिक कोशिकाओं के भीतर गहरे संकल्प के साथ आणविक मुलाकातों की जांच के कारण स्वाभाविक कमजोर संकेतों व्यक्तिगत अणुओं से उत्पन्न होने वाली चुनौतीपूर्ण बनी हुई है. यांग एट अल द्वारा हाल ही में काम करता है. दिखा दिया है कि संकीर्ण क्षेत्र epifluorescence माइक्रोस्कोपी nucleocytoplasmic परिवहन के एकल अणु के स्तर पर दृश्य की अनुमति देता है. एकल अणु दृष्टिकोण संकेत निर्भर और स्वतंत्र कार्गो अणुओं के लिए परमाणु परिवहन समय और दक्षता के रूप में महत्वपूर्ण कैनेटीक्स, के द्वारा प्राप्त किया गया है. यहाँ हम methodological दृष्टिकोण के लिए 0.4 एमएस और 12 एनएम के एक बेहतर spatiotemporal संकल्प के साथ एक प्रोटोकॉल का वर्णन. सुधार के प्रस्ताव हमें परमाणु ताकना परिसरों (एनपीसी) के माध्यम से अर्द्ध बरकरार कोशिकाओं में क्षणिक सक्रिय परिवहन और निष्क्रिय प्रसार की घटनाओं पर कब्जा करने के लिए सक्षम होना चाहिए. हम इस विधि कोशिकाओं के भीतर अन्य बाध्यकारी और तस्करी की घटनाओं elucidating में इस्तेमाल किया जा करने के लिए उम्मीद है.
Protocol
Discussion
ध्यान के प्रयोग के दौरान पूर्वोत्तर और एकल अणुओं की एक उचित colocalization बीमा लिया जाना चाहिए. यह भी एक उच्च संकेत शोर अनुपात प्रदान करने के लिए महत्वपूर्ण है, खासकर जब संकेत कम है गरीब लेबलिंग या photobleaching के कारण. …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस परियोजना अनुसंधान क्षमता संवर्धन अनुदान (बॉलिंग ग्रीन स्टेट यूनिवर्सिटी) द्वारा समर्थित किया गया.
Riferimenti
- Ma, J., Yang, W. Single Molecule Snapshots of Three-Dimensional Distribution of Transient Interactions in Nuclear Pore Complex. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. , (2010).
- Sarma, A., Goryaynov, A., Yang, W. Single Molecule Imaging of the Calcium-Regulated Nuclear Pore Permeability. , .
- Yang, W., Musser, M. S. Visualizing single molecules transiting through nuclear pore complexes using narrow-field epifluorescence microscopy. Methods. 39, 316-328 (2006).
- Yang, W., Gelles, J., Musser, M. S. Imaging of single-molecule translocation through nuclear pore complexes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 101, 12887-12892 (2004).
