I denna artikel visar vi en metod för att göra glas kapillär nålar med ett 50-ìm lumen. Denna teknik minskar betydligt hjärnskador, minimerar passiv diffusion av droger och tillåter en exakt inriktning i gnagare hjärnan.
Abstract
Microinjections i hjärnparenkymet är viktiga rutiner för att leverera läkemedel, virala vektorer eller transplantationer cell. Hjärnan lesion som en injektion nål producerar under sin bana är ett stort problem, särskilt i musen hjärnan för inte bara hjärnan är liten, men ibland också flera injektioner behövs. Vi visar här en metod att tillverka glas kapillär nålar med en 50-ìm lumen som avsevärt minskar hjärnskador och tillåter en exakt inriktning i gnagare hjärnan. Denna metod ger en leverans av små volymer (från 20 till 100 Nl), minskar blödningar risker och minimerar passiv diffusion av narkotika till hjärnparenkymet. Genom att använda olika storlek kapillärrör glasrör eller ändra nålen lumen kan flera typer av ämnen och celler injiceras. Microinjections med ett glas kapillärrör utgör en betydande förbättring i injektionen tekniker och deep brain inriktning med minimala skador i smågnagare.
Protocol
Gör glas nålar innan musen kirurgi: Sätt kapillär glasrör i en mikropipett avdragare. Hetta upp mitt i glasrör för att mjuka upp glasrör i lokala området. Sträck glasröret längs dess längsgående axel med en inledande sträcka tillräcklig för att orsaka en minskning av diametern på glasröret i lokala området. Håll sträcker glasröret tills det går sönder. På detta sätt är två identiska enda fat nålar erhållits. Sätt glaset nål i en m…
Discussion
Metoden visade i denna video är mycket användbar för att leverera de flesta av de läkemedel eller virala vektorer i mycket exakta platser i hjärnan. Några av de viktigaste fördelarna med denna teknik är tillförlitlighet mäter, riktigheten av injektioner och den lilla storleken på hjärnan lesion och tarmkanalen skador 1, 2, 5, 6. När tekniken är standardiserad intervallet mistargeting bör 50 ìm eller mindre 1, 2. Cell transplantationer kan också göras genom att använda bredare, 10…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
OG-P stöddes av CONACyT s bidrag (CB-2008 till 101.476) och FRABA (686/10). AQ-H som stöds av National Institute of Health, Howard Hughes Medical Institute, Robert Wood Johnson Foundation och Maryland Stem Cell Foundation.
Gonzalez-Perez, O., Guerrero-Cazares, H., Quiñones-Hinojosa, A. Targeting of Deep Brain Structures with Microinjections for Delivery of Drugs, Viral Vectors, or Cell Transplants. J. Vis. Exp. (46), e2082, doi:10.3791/2082 (2010).