Targeting van Deep Brain Structuren met micro-injecties voor de levering van drugs, virale vectoren, of Cell Transplantaties

Summary

In dit artikel tonen we een methode om glazen capillaire naalden te maken met een 50-um lumen. Deze techniek vermindert de schade aan de hersenen, minimaliseert passieve diffusie van geneesmiddelen en maakt een nauwkeurige targeting naar de knaagdieren hersenen.

Abstract

Micro-injecties in de hersenen parenchym van belang zijn procedures aan drugs, virale vectoren of cel transplantatie te leveren. De hersenen letsel dat een naald injecteren produceert tijdens zijn baan is een groot probleem vooral in de hersenen van muizen niet alleen voor de hersenen is klein, maar soms ook meerdere injecties nodig zijn. We tonen hier een methode om glazen capillaire naalden te produceren met een 50-um lumen die aanzienlijk vermindert de schade aan de hersenen en maakt het mogelijk een nauwkeurige targeting naar de knaagdieren hersenen. Met deze methode kan een levering van kleine hoeveelheden (20 tot 100 nl), vermindert het bloeden risico's, en minimaliseert passieve verspreiding van drugs in de hersenen parenchym. Door het gebruik van verschillende grootte van capillaire glazen buisjes, of het wijzigen van de naald lumen, kunnen verschillende soorten stoffen en cellen worden geïnjecteerd. Micro-injecties met een glazen capillair vertegenwoordigen een aanzienlijke verbetering in injectietechnieken en deep brain richten met minimale collateral damage in de kleine knaagdieren.

Protocol

Maak glazen naalden voor de muis de operatie: Zet de capillaire glazen buis in een micropipet trekker. Verwarm het midden van de glazen buis om de glazen buis verzachten in de gelokaliseerde gebied. Stretch de glazen buis langs zijn lengteas door een eerste afstand voldoende is om een ​​vermindering van de diameter van de glazen buis in de gelokaliseerd gebied veroorzaken. Houd het uitrekken van de glazen buis tot het breekt. Op deze manier worden twee identieke enkele vat naald…

Discussion

De methode bleek in deze video is zeer nuttig voor de meeste van de drugs of virale vectoren te leveren in een zeer precieze plaatsen in de hersenen. Enkele van de belangrijkste voordelen van deze techniek zijn de betrouwbaarheid van de targeting punt, de nauwkeurigheid van injecties en het kleine formaat van de hersenen letsel en schade-darmkanaal ^{1, 2, 5, 6.} Zodra de techniek is gestandaardiseerd het bereik van de mistargeting moet 50 micrometer of kleiner ^{1, 2.} Cel transplantaties kan ook gedaan…

Materials

Material Name	Tipo	Company	Catalogue Number	Comment
Capillary glass tube		Wiretrol I	5-000-1001
Micropipette puller		Kopf	Model 730
Microforge		World Precision Instruments	Model 48000
Mineral oil		MSDS	M7700
High-vacuum grease		Dow Corning	05054-AB
Anesthesia: 2.5% Avertin				2,2,2-tribromoethanol + tert-amyl alcohol, 1:1 w/v
Heater pad		Mastex	Model 900
Stereotactic device		Kopf	Model Kopf-900
Surgical scalpel blade # 15		Medi-Cut
Micro driller		Ideal Micro Drill	67-1000
Fine forceps		Fine Scientific Tools
1-μL Micropipette		Rainin
Parafilm M.
Surgical microscope		Zeiss	Vasiorkop with Contraves system
Microinjector		Narishige	Model MO-10