レーザーアブレーションのエレクトロスプレーイオン化(LAESI)は質量分析用大気圧イオン源です。イメージングモードでは、中赤外レーザーのプローブは組織切片またはバイオフィルム全体の分子の分布。この手法は、ネイティブの実験条件の下で実施、多様な生物分析研究のための新しいアプローチを提示。
質量分析法で、周囲のイオン化法は、分析調査がネイティブのような実験条件下では組織やバイオフィルム上で直接実行することができます。レーザーアブレーションのエレクトロスプレーイオン化(LAESIは)そのような開発であり、特に水を含む試料の調査に適しています。 LAESIはサンプルの水分子を励起する中赤外レーザービーム(2.94μmの波長)を利用しています。アブレーションのフルエンスのしきい値を超過した場合、サンプルの材料は、粒子状物質の形で追放し、これらの発射は、試料表面上のミリメートルの数十に移動される。 LAESIでは、このアブレーションプルームが放出された試料の一部をキャプチャし、気相イオンにその化学成分を変換するために高度に帯電した水滴により代行受信されます。大気圧イオン源のインタフェースを装備した質量分析計は、試料のプローブ領域(ピクセル)に由来する放出イオンの組成を分析し、記録するために採用されている。画素の配列に対する体系的な尋問は微小分析モードでの分子イメージングへの道を開きます。 LAESIの質量分析イメージングのユニークな点は、横方向のイメージングとの組み合わせで、3次元(3D)分子イメージングを可能にする、深さプロファイリングです。 〜100μmであり、それぞれ〜40μmの、の現在の横方向と深さの解像度で、LAESI質量分析イメージングは、生体組織の分子構造を探索するのに役立ちます。ここで、我々はLAESIシステムの主要な要素を確認し、成功するイメージングの実験のためのガイドラインを提供しています。
異なる組織型はこれらの影響を緩和するために順番に、試料のアブレーション特性に影響を与えることができる、含水率と引張強度、9はさまざまです、それは間を変更するときにレーザーのフルエンス、サンプルの処理、および分析のプロトコルが改訂されることが望まれている主要な組織の種類。
単一のセルまたはより高い解像度の調査のため、中赤外光の代わりに、フォーカスレンズのシャープ、光ファイバに結合することができます。10は組織内の選択したセルのすぐ近くに光ファイバの先端を配置することにより、LAESI分析はで行うことができます。単一細胞レベル。
ラベルフリー周囲イオン化質量分析用イオン源として、11 LAESIは組織中の生化学的プロセスの研究に大きな可能性を示している。直接解析、横方向と3次元イメージングの利点を得ることも、LAESIは、プロファイリングと同様に画像処理アプリケーションのための新興バイオ分析ツールです。
The authors have nothing to disclose.
著者らは、米国エネルギー省(DEFG02 – 01ER15129)で、グラント番号0719232の下に米国国立科学財団によるこの作品の財政支援に感謝しています、とプロテアBiosciences社(ウェストバージニア州モーガンタウン)で。また、作者はプロトコルのビデオ撮影中に彼女の助けのためにジェシカA. Stoleeに感謝したいと思います。
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
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Mass spectrometer | Waters Co. (Milford, MA) | Q-TOF Premier | ||
Mid-IR laser | Opotek Inc. (Carlsbad, CA) | Vibrant IR |