אוראלית של Rotenone באמצעות Gavage וניתוח מקדימה של Alpha-synuclein תכלילים במערכת העצבים enteric
Summary
מחלת פרקינסון כבר קשור לחשיפה לחומרי הדברה. כאן אנו מציגים שיטה כדי לספק חומרי הדברה באמצעות צינור קיבה בריכוז הרצוי שיטה לנתח את ההשפעה שלהם הצטברות אלפא synuclein במערכת העצבים enteric.
Abstract
ב (PD) ומחלת פרקינסון המטופלים, את הפתולוגיה הקשורה כדלקמן דפוס אופייני מעורבים בין היתר 1,2 enteric העצבים (ENS) מערכת, את הנורה חוש הריח (OB), הגרעין מנוע הגבי של התועה (משרד הרישוי) 3, intermediolateral גרעין של 4 חוט השדרה ואת nigra substantia, שסיפק את הבסיס ביים את neuropathological של המחלה 4,5. ENS ו OB הם מבנים העצבים חשופים ביותר הראשונים להיות מושפעים. מעניין, פ"ד כבר הקשורים לחשיפה לחומרי הדברה 6-8. כאן אנחנו מראים בפירוט שתי שיטות השתמשו במחקר הקודם שלנו 9. כדי לנתח את ההשפעות של rotenone משחק מקומי על ENS, אנו rotenone מנוהל באמצעות gavage כדי שנה אחת C57/BL6 עכברים ישנים. Rotenone היא שימוש נרחב בחומרי הדברה, כי בתוקף מעכב קומפלקס המיטוכונדריה אני 10. זה lipophylic מאוד ונספג היטב את מערכת העיכול 11. התוצאות שלנו הראו כי הממשל של 5 מ"ג / ק"ג של rotenone לא לעכב קומפלקס המיטוכונדריה אני בפעילות השריר או המוח. לפיכך, טוען כי באמצעות שיטת הממשל שלנו rotenone לא לחצות את מערכת hepatoportal והיה פועל אך ורק על ENS. כאן אנו מציגים שיטה לנהל הדברה באמצעות gavage ואת פרוטוקול ניתוח תמונת להשתמש כדי לנתח את ההשפעות של חומרי הדברה ב הצטברות אלפא synuclein ב ENS. החלק הראשון מציג שיטה המאפשרת ניהול intragastric של חומרי הדברה (rotenone) בריכוז המדויק הרצוי. השיטה השנייה מראה חצי אוטומטי ניתוח התמונה פרוטוקול לנתח אלפא synuclein הצטברות של ENS באמצעות תוכנת ניתוח התמונה.
Protocol
Discussion
הממשל Intragastric שבוצעה בעבר 12. עם זאת, על פי כתב היד של Inden, rotenone היה מנוהל מומס מלח 0.5% carboxymethylcellulose נתרן (CMSS) לבד. Rotenone הוא חומר liphophylic גבוהה. לכן, rotenone לא יכול להיות מומס CMSS 0.5% בלבד ויהיה להאיץ אם נעשה כך. השימוש כלורופורם יוצר ההשעיה rotenone מופץ באופן שווה הימנעות משקעים…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ברי פדרו דה לה מסה קרן נתמך העבודה הזאת.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Rotenone | SIGMA-Aldrich | R8875 | Germany | |
| Chloroform | Carl Roth | 3313.1 | Germany | |
| Carboxymethylcellulose | SIGMA-Aldrich | C5678 | Germany | |
| Gavage 1,2 mm x 60 mm | Unimed | Switzerland | ||
| LSM 510 | Zeiss Microscopes | |||
| FIJI | http://pacific.mpi-cbg.de |
Riferimenti
- Braak, H., de Vos, R. A., Bohl, J., Del Tredici, K., K, . Gastric alpha-synuclein immunoreactive inclusions in Meissner’s and Auerbach’s plexuses in cases staged for Parkinson’s disease-related brain pathology. Neurosci Lett. 396, 67-72 (2006).
- Wakabayashi, K., Takahashi, H., Ohama, E., Ikuta, F. Parkinson’s disease: an immunohistochemical study of Lewy body-containing neurons in the enteric nervous system. Acta Neuropathol. 79, 581-583 (1990).
- Wakabayashi, K. Restricted occurrence of Lewy bodies in the dorsal vagal nucleus in a patient with late-onset parkinsonism. J Neurol Sci. 165, 188-191 (1999).
- Braak, H., Sastre, M., Bohl, J. R., de Vos, R. A., Del Tredici, K. Parkinson’s disease: lesions in dorsal horn layer I, involvement of parasympathetic and sympathetic pre- and postganglionic neurons. Acta Neuropathol. 113, 421-429 (2007).
- Braak, H., Ghebremedhin, E., Rub, U., Bratzke, H., Del Tredici, K. Stages in the development of Parkinson’s disease-related pathology. Cell Tissue Res. 318, 121-134 (2004).
- Gorell, J. M., Johnson, C. C., Rybicki, B. A., Peterson, E. L., Richardson, R. J. The risk of Parkinson’s disease with exposure to pesticides, farming, well water, and rural living. Neurology. 50, 1346-1350 (1998).
- Semchuk, K. M., Love, E. J., Lee, R. G. Parkinson’s disease and exposure to agricultural work and pesticide chemicals. Neurology. 42, 1328-1335 (1992).
- Butterfield, P. G., Valanis, B. G., Spencer, P. S., Lindeman, C. A., Nutt, J. G. Environmental antecedents of young-onset Parkinson’s disease. Neurology. 43, 1150-1158 (1993).
- Pan-Montojo, F. Progression of Parkinson’s disease pathology is reproduced by intragastric administration of rotenone in mice. PLoS One. 5, e8762-e8762 (2010).
- Sherer, T. B. Mechanism of toxicity in rotenone models of Parkinson’s disease. J Neurosci. 23, 10756-10764 (2003).
- Bove, J., Prou, D., Perier, C., Przedborski, S. Toxin-induced models of Parkinson’s disease. NeuroRx. 2, 484-494 (2005).
- Inden, M. Neurodegeneration of mouse nigrostriatal dopaminergic system induced by repeated oral administration of rotenone is prevented by 4-phenylbutyrate, a chemical chaperone. J Neurochem. 101, 1491-1504 (2007).
