La administración oral de la rotenona con una sonda y Análisis de Imágenes de la alfa-sinucleína inclusiones en el sistema nervioso entérico
Summary
La enfermedad de Parkinson se ha relacionado con la exposición a plaguicidas. Aquí se muestra un método para entregar los pesticidas mediante un tubo gástrico a la concentración deseada y un método para analizar su efecto en la acumulación de alfa-sinucleína en el sistema nervioso entérico.
Abstract
En la enfermedad de Parkinson (EP) de los pacientes, la patología asociada sigue un patrón característico implican entre otras cosas, el sistema nervioso entérico (SNE) 1,2, el bulbo olfatorio (OB), el núcleo motor dorsal del vago (DMV) 3, la intermediolateral núcleo de las 4 de la médula espinal y la sustancia negra, proporcionando la base para la puesta en escena neuropatológicos de la enfermedad 4,5. La ENS y OB son las estructuras más expuestas nervioso y los primeros en verse afectados. Curiosamente, PD se ha relacionado con la exposición a plaguicidas 6-8. Aquí se muestra en detalle dos métodos utilizados en nuestro estudio anterior 9. Con el fin de analizar los efectos de la rotenona actúa localmente en el ENS, se administró utilizando una sonda rotenona a un año de edad C57/BL6 ratones. La rotenona es un pesticida muy utilizado que inhibe fuertemente complejo I mitocondrial 10. Es muy lipofílicos y absorbe mal en el tracto gastrointestinal 11. Nuestros resultados mostraron que la administración de 5 mg / kg de la rotenona no inhibió la actividad de complejo I mitocondrial en el músculo o en el cerebro. Por lo tanto, lo que sugiere que el uso de rotenona nuestro método de administración no cruzó el sistema hepatoportal y se actúa solamente en la ENS. Aquí se muestra un método para administrar los pesticidas con una alimentación por sonda y el protocolo de análisis de imágenes para analizar los efectos de los plaguicidas en la acumulación de alfa-sinucleína en la ENS. La primera parte muestra un método que permite la administración intragástrica de plaguicidas (rotenona) a una concentración deseada precisión. El segundo método muestra la imagen de un protocolo semi-automático de análisis para analizar la acumulación de alfa-sinucleína en la ENS utilizando un software de análisis de imagen.
Protocol
Discussion
La administración intragástrica se ha realizado previamente 12. Sin embargo, según el manuscrito de Inden, rotenona se administró la sal disuelta en carboximetilcelulosa 0,5% de sodio (CMSS) por sí sola. La rotenona es una sustancia liphophylic alta. Por lo tanto, la rotenona no puede ser disuelto en el CMSS 0,5% solo y se precipitará si se hace así. El uso de cloroformo crea una suspensión rotenona uniformemente distribuida para evitar la precipitación. Además, debido a las mayores concentraciones …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
El Pedro Barrie de la Maza Fundación apoya este trabajo.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Rotenone | SIGMA-Aldrich | R8875 | Germany | |
| Chloroform | Carl Roth | 3313.1 | Germany | |
| Carboxymethylcellulose | SIGMA-Aldrich | C5678 | Germany | |
| Gavage 1,2 mm x 60 mm | Unimed | Switzerland | ||
| LSM 510 | Zeiss Microscopes | |||
| FIJI | http://pacific.mpi-cbg.de |
Riferimenti
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