L'injection d'ARNdb dans Femme Mosquitos aegypti A.

Summary

Inverse des approches génétiques se sont avérées extrêmement utiles pour déterminer quels gènes de résistance sous-tendent à des agents pathogènes vecteurs de moustiques. Ce protocole vidéo illustre une méthode utilisée par le laboratoire de James à injecter dans les ARNdb femelles moustiques A. aegypti, qui abritent le virus de la dengue. La technique pour l'étalonnage des aiguilles d'injection, de manipuler la configuration d'injection, et l'injection ARNdb dans le thorax est illustré.

Abstract

Inverse des approches génétiques se sont avérées extrêmement utiles pour déterminer quels gènes de résistance sous-tendent à des agents pathogènes vecteurs de moustiques. Ce protocole vidéo illustre une méthode utilisée par le laboratoire de James à injecter dans les ARNdb femelles moustiques A. aegypti, qui abritent le virus de la dengue. La technique pour l'étalonnage des aiguilles d'injection, de manipuler la configuration d'injection, et l'injection ARNdb dans le thorax est illustré.

Protocol

Faire des aiguilles de microinjection en tirant des tubes capillaires en verre. Nous utilisons un extracteur d'aiguilles à partir du CO Instrument Sutter, (modèle P-2000). Les spécifications d'aiguille extracteur programme sont: la chaleur: 275 Fil: 3 vel: 37 del: 250 Pul: 125 Charger un volume connu (par exemple, 1 pi) d'eau dans les aiguilles et les marquer manuellement la balance avec un Sharpie fine. Mettre en place une tasse de post-injection p…