Iniezione di dsRNA in femmine di A. aegypti Zanzare

Summary

Reverse approcci genetici si sono dimostrati estremamente utili per determinare quali geni di resistenza agli agenti patogeni sottostanti vettore nelle zanzare. Questo protocollo video illustra un metodo utilizzato dal laboratorio di James per iniettare dsRNA in femmine di A. aegypti zanzare, che ospitano il virus dengue. La tecnica per la calibrazione di aghi da iniezione, manipolare la configurazione di iniezione e iniezione di dsRNA nel torace è illustrato.

Abstract

Reverse approcci genetici si sono dimostrati estremamente utili per determinare quali geni di resistenza agli agenti patogeni sottostanti vettore nelle zanzare. Questo protocollo video illustra un metodo utilizzato dal laboratorio di James per iniettare dsRNA in femmine di A. aegypti zanzare, che ospitano il virus dengue. La tecnica per la calibrazione di aghi da iniezione, manipolare la configurazione di iniezione e iniezione di dsRNA nel torace è illustrato.

Protocol

Fai aghi microiniezione tirando tubi di vetro capillari. Noi utilizziamo un estrattore ago dal CO Strumento Sutter, (modello P-2000). Le specifiche estrattore programma aghi sono i seguenti: di calore: 275 fil: 3 vel: 37 Del: 250 PUL: 125 Carico di un volume noto (ad esempio, 1 ml) di acqua nel aghi e contrassegnare manualmente la bilancia con un pennarello fine. Impostare una post-iniezione di coppa per le zanzare. Prima tagliare la punta più esterno al largo di…