La inyección de dsRNA en Mujer A. aegypti mosquitos

Summary

Invertir enfoques genéticos han demostrado ser extremadamente útil para determinar qué genes de resistencia a patógenos vector subyacente en los mosquitos. Este protocolo de vídeo ilustra un método usado por el laboratorio de James para inyectar dsRNA en hembras de A. aegypti, que albergan el virus del dengue. La técnica para la calibración de agujas de inyección, la manipulación de la configuración de la inyección, y la inyección de dsRNA en el tórax se ilustra.

Abstract

Invertir enfoques genéticos han demostrado ser extremadamente útil para determinar qué genes de resistencia a patógenos vector subyacente en los mosquitos. Este protocolo de vídeo ilustra un método usado por el laboratorio de James para inyectar dsRNA en hembras de A. aegypti, que albergan el virus del dengue. La técnica para la calibración de agujas de inyección, la manipulación de la configuración de la inyección, y la inyección de dsRNA en el tórax se ilustra.

Protocol

Hacen que las agujas de microinyección tirando tubos capilares. Nosotros usamos un extractor de aguja de CO Instrumento Sutter, (modelo P-2000). Las especificaciones extractor aguja programa son: calor: 275 fil: 3 vel: 37 del: 250 pul: 125 Cargar un volumen conocido (por ejemplo, un l) de agua en las agujas y el manual de marca de la escala con un rotulador fino. Establecer una taza después de la inyección para los mosquitos. Primero corta la punta más exterio…