Yetişkin gelen Oenocytes diseksiyonu Drosophila melanogaster</em
Summary
Böcekler, oenocytes cuticular hidrokarbon bileşikleri üretir. Bu bileşikler kuruma karşı korumak ve kimyasal iletişimi kolaylaştırmak. Burada yetişkin oenocytes izole etmek için kullanılan bir diseksiyon tekniği göstermek<em> Drosophila melanogaster</em> Göstermek ve bu hazırlık hidrokarbon sentezinde yer alan genlerin çalışma nasıl yararlanılabilir.
Abstract
Içinde<em> Drosophila melanogaster</em>, Diğer böceklerde olduğu gibi, hidrokarbon bileşikleri öncelikle oluşur manikür dış yüzeyinde bir balmumu tabakası, kuruma ve diğer çevre sorunlarına karşı koruma sağlar. Çeşitli (ÇHC), bu cuticular hidrokarbon bileşikleri de semiochemical sinyalleri olarak işlev gibi, aynı türün üyeleri arasında pheromonal iletişim aracılık, veya farklı türler ve etkisi davranış arasındaki bazı durumlarda. Oenocytes olarak adlandırılan özel hücreler ÇHC sentezi için birincil site olarak kabul edilmektedir. Ancak, nispeten daha az biyosentetik, ulaşım ve ÇHC çıkış katkıda birikimi yollar yönetmelikte oenocytes katılımı ile ilgili bilinir. CHCs böceğin biyolojisinin, kimyasal iletişim, kuruma direnç ve bağışıklık de dahil olmak üzere çeşitli yönleri, oynadığı önemli rol göz önüne alındığında, bu özel hücre içinde moleküler ve genetik ÇHC üretim yönetmelik daha büyük bir anlayış kazanmak önemlidir. Yetişkin oenocytes<em> D. melanogaster</em> Karın kabuklarıyla içinde bulunur ve metamerically her abdominal segmentinin iç cuticular yüzeyi boyunca yayılan şerit gibi kümeler halinde dizilmiş. Bu video makalede yetişkinin oenocytes hazırlanması için kullanılan bir diseksiyon tekniği göstermektedir.<em> D. melanogaster</em>. Özellikle, (1) fileto nasıl bir yetişkin hazırlamak için ayrıntılı bir adım-adım gösteri<em> Drosophila</em> Karın, (2) oenocytes nasıl belirlemek ve onları diğer dokulardan ayırt ve (3) karın kabuklarıyla nasıl sağlam oenocyte kümeleri kaldırmak için. Bu preparatın hidrokarbon sentezi ilgili genler ifade incelemek için nasıl kullanılabileceğini kısa bir deneysel resimde yer almaktadır. Disseke hazırlık Burada yetişkin meyve sineği oenocyte işlevi ayrıntılı moleküler ve genetik analiz için izin verecek gösterdi.
Protocol
Discussion
Bu video makalede yetişkin oenocytes hazırlanması için ayrıntılı bir diseksiyon protokolü mevcut D. moleküler analiz için uygun bir şekilde melanogaster. Başka bir yerde 2 kısaltılmış bir metin tabanlı hesabı diseksiyon yöntemi tarif edilmiştir, ve oenocyte hazırlık, hem de RNA ve protein 2 ekstraksiyonu için uygun kanıtlanmıştır . Bu preparatın kullanılması, aynı zamanda kültür eksplante oenocytes için yöntemler geliştirmek mümkün olabilir. O…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Biz ona yardım için bu video makalenin filme Amsale Belay teşekkür etmek istiyorum. Bu çalışma CIHR, NSERC ve CRC JDL için hibe tarafından finanse edildi.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Sylgard | Dow Corning | |||
| Tungsten Wire | Ted Pella, Inc. | 27-11 | 0.005”/20’ | |
| Forceps | Dumont | 11252-30 | #5 | |
| Shields and Sang M3 Insect Medium | Sigma | S3652 | ||
| RNeasy Micro Kit | Qiagen | 74004 | ||
| qScript cDNA Synthesis Kit | Quanta Biosciences | 95047-100 | ||
| Monoject Hypodermic Needle | Harvard Apparatus | 722289 | 20G1 with aluminum hub |
Riferimenti
- Wielowiejski, H. Ueber das blutgewebe der insekten. Zeit. Wiss. Zool. 43, 512-536 .
- Krupp, J. J., Kent, C., Billeter, J. C., Azanchi, R., So, A. K., Schonfeld, J. A., Smith, B. P., Lucas, C., Levine, J. D. Social experience modifies pheromone expression and mating behavior in male Drosophila melanogaster. Curr. Biol. 18, 1373-1383 (2008).
- Locke, M. Surface membranes, Golgi complexes, and vacuolar systems. Annu. Rev. Entomol. 48, 1-27 (2003).
- Billeter, J. C., Atallah, J., Krupp, J. J., Millar, J. G., Levine, J. D. Specialized cells tag sexual and species identity in Drosophila melanogaster. Nature. 461, 987-991 (2009).
- Gould, A. P., Elstob, P. R., Brodu, V. Insect oenocytes: a model system for studying cell-fate specification by Hox genes. J. Anat. 199, 25-33 (2001).
- Lawrence, P. A., Johnston, P. Cell lineage of the Drosophila abdomen: the epidermis, oenocytes and ventral muscles. J. Embryol. Exp. Morphol. 72, 197-208 (1982).
- Johnson, M. B., Butterworth, F. M. Maturation and aging of adult fat body and oenocytes in Drosophila as revealed by light microscopic morphometry. J. Morphol. 184, 51-59 (1985).
- Gutierrez, E., Wiggins, D., Fielding, B., Gould, A. P. Specialized hepatocyte-like cells regulate Drosophila lipid metabolism. Nature. 445, 275-280 (2007).
- Marcillac, F., Bousquet, F., Alabouvette, J., Savarit, F., Ferveur, J. F. A mutation with major effects on Drosophila melanogaster sex pheromones. Genetica. 171, 1617-1628 (2005).
- Chertemps, T., Duportets, L., Labeur, C., Ueyama, M., Wicker-Thomas, C. A female-specific desaturase gene responsible for diene hydrocarbon biosynthesis and courtship behaviour in Drosophila melanogaster. Insect Mol. Biol. 15, 465-473 (2006).
- Legendre, A., Miao, X. X., Da Lage, J. L., Wicker-Thomas, C. Evolution of a desaturase involved in female pheromonal cuticular hydrocarbon biosynthesis and courtship behavior in Drosophila. Insect. Biochem. Mol. Biol. 38, 244-255 (2008).
- Shirangi, T. R., Dufour, H. D., Williams, T. M., Carroll, S. B. Rapid evolution of sex pheromone-producing enzyme expression in Drosophila. PLoS Biol. 7, e1000168-e1000168 (2009).
