Organotypische Slice Cultuur van E18 Rat Brains
Abstract
Organotypische slice culturen van embryonale knaagdier hersenen worden op grote schaal gebruikt om de ontwikkeling van de hersenen te bestuderen. Hoewel er vaak voordelen om een in-vivo-systeem, organotypische slice culturen laten een tot een aantal manipulaties die momenteel niet haalbaar in-vivo uit te voeren. Tot op heden organtotypic embryonale hersenen slice culturen zijn gebruikt om individuele cellen met behulp van time-lapse microscopie te volgen, de expressie van genen in het ganglionisch emanances (een gebied dat is moeilijk te richten door in-utero elektroporatie) te manipuleren, maar ook voor farmacologische studies. In deze video protocol waarin we laten zien hoe organotypische slice culturen te maken uit embryonale rat dag 18 embryo's. Het protocol houdt in het ontleden van de embryo's, inbedding ze op ijs in een lage smelt agarose, het snijden van de ingesloten hersenen op de vibratome, en tenslotte plating de plakjes op filters in de cultuur gerechten. Dit protocol is ook van toepassing in de huidige vorm tot het maken organotypische slice culturen uit verschillende embryonale leeftijden voor zowel ratten en muizen.
