Organotypischen Kultur der E18 Gehirn von Ratten

Abstract

Organotypischen Kulturen von embryonalen Nagetier Gehirne sind weit verbreitet, um die Entwicklung des Gehirns zu studieren. Während es oft Vorteile, eine in-vivo-System, ermöglichen organotypischen Kulturen zu einem zu einer Reihe von Manipulationen, die nicht gegenwärtig machbar in-vivo durchzuführen. Bis heute organtotypic embryonalen Hirnschnitt Kulturen wurden verwendet, um einzelne Zellen mit Zeitraffer-Mikroskopie folgen, manipulieren die Expression von Genen in den Ganglien-emanances (eine Region, die schwer zu in-utero Elektroporation Ziel ist), sowie für die pharmakologische Studien. In diesem Video-Protokoll zeigen wir, wie an organotypischen Kulturen von Ratten embryonalen Tag 18 Embryonen zu machen. Das Protokoll beinhaltet Zerlegung der Embryonen, die Einbettung auf Eis in niedrig schmelzende Agarose, schneiden die embedded brains am Vibratom und schließlich Beschichtung der Scheiben auf Filter in Kulturschalen. Dieses Protokoll ist auch in seiner jetzigen Form zu machen organotypischen Kulturen aus verschiedenen embryonalen Alter sowohl für Ratten und Mäusen anwendbar.