यह वीडियो फर्क और विदारक पोस्टमार्टम आँखों में मानव कांच का शरीर के विभिन्न अर्द्ध पारदर्शी संरचनाओं के लिए एक प्रभावी तकनीक से पता चलता है.
कांच का एक ऑप्टिकली स्पष्ट, collagenous बाह्य मैट्रिक्स है कि आँख और रेटिना overlies के अंदर भरता है कांच substructures और रेटिना के बीच 1,2 असामान्य बातचीत आंसू और रेटिना टुकड़ी, धब्बेदार तह, धब्बेदार छेद सहित कई vitreoretinal रोगों, आबाद, उम्र से संबंधित धब्बेदार अध: पतन, vitreomacular कर्षण, proliferative vitreoretinopathy, proliferative मधुमेह रेटिनोपैथी, और विरासत में मिला vitreoretinopathies 1,2. शीशे substructures की आणविक संरचना ज्ञात नहीं है. चूंकि कांच शरीर सीमित शल्य चिकित्सा का उपयोग के साथ पारदर्शी है, यह मुश्किल हो गया है अपने substructures को आणविक स्तर पर अध्ययन. हम एक अलग और प्रोटिओमिक और जैव रासायनिक विश्लेषण के लिए इन ऊतकों के संरक्षण की विधि विकसित की है. इस प्रयोगात्मक वीडियो में विच्छेदन तकनीक से पता चलता है कैसे कांच का आधार है, पूर्वकाल hyaloid, कांच कोर, और शवपरीक्षा मानव आँखों से शीशे प्रांतस्था को अलग करने के लिए. प्रत्येक कांच घटक के एक आयामी एसडीएस पृष्ठ विश्लेषण से पता चला है कि हमारे विच्छेदन तकनीक चार अद्वितीय प्रोटीन मानव कांच का शरीर के प्रत्येक बुनियाद इसी प्रोफाइल के परिणामस्वरूप. विभिन्न compartmentalized प्रोटीन की पहचान उम्मीदवार अणुओं विभिन्न vitreoretinal रोगों अंतर्निहित प्रकट होगा.
कांच का आधार है, कोर, प्रांतस्था, और पूर्वकाल hyaloid: कांच शरीर अर्द्ध पारदर्शी एक जेल जिनकी आणविक संरचना खराब अपने substructures के स्तर पर विशेष रूप से समझा है. कांच कोर कोलेजन द्वितीय, वी, ग्यारहवीं, और XI होते हैं, chondroitin सल्फेट proteoglycans, हेपारन सल्फेट proteoglycans, और 1,2 hyaluronan. शीशे कोर में प्रोटीन बायोमार्कर के साथ मधुमेह रेटिनोपैथी जैसे रोगों के साथ संबद्ध किया गया 3-5 . इन प्रोटीनों substructures के प्रत्येक में विभिन्न व्यक्त कर रहे हैं, और कई मामलों में विशिष्ट प्रोटीन की पहचान, नहीं जाना जाता है. ये विवरण अंतर्दृष्टि विशिष्ट vitreoretinal रोगों के साथ जुड़े प्रोटीन के मूल दे और लक्ष्य भविष्य उपचार में मदद मिल सकती है. हालांकि ऊतक विच्छेदन के लिए इष्टतम पोस्टमार्टम अंतराल निर्धारित नहीं किया गया है, प्रोटीन गिरावट बहाव के प्रयोगों को प्रभावित कर सकता है. उदाहरण के लिए, immunohistochemistry 12 घंटे शवपरीक्षा आँखों में प्रभावित है और कुछ विशेष एंजाइम गतिविधियों के कुछ ही घंटों के भीतर कम किया जा सकता है (अप्रकाशित अवलोकन). इस अध्ययन में सभी ऊतकों की मौत के 2 और 8 घंटे के बीच प्रोटीन अभिव्यक्ति या प्रोटिओमिक्स analsyis के लिए उपयुक्तता में महत्वपूर्ण बदलाव के बिना एकत्र किए गए थे. संरक्षण के तरल नाइट्रोजन ठंड विधि निर्धारण पर चुना जाता है लगानेवाला पार जोड़ने, जो LC-MS/MS द्वारा किया गया है अन्य ऊतकों में प्रदर्शन की वजह से प्रोटीन संरचना में छोटे परिवर्तन को रोकने के क्रम में 6 प्रोटिओमिक अध्ययन सही करने के लिए की क्षमता पर निर्भर करेगा कांच के विभिन्न डिब्बों के रूप में इस वीडियो प्रयोग में प्रदर्शन काटना. हम विच्छेदन तकनीक का उपयोग कर एक आयामी एसडीएस PAGE पुष्टि की है. जैसा कि हमारे परिणाम बताते हैं, वहाँ विभिन्न विभिन्न कांच का शरीर substructures में प्रोटीन व्यक्त कर रहे हैं. इन प्रोटीनों की पहचान कांच compartmentalization की एक अधिक विस्तृत समझ प्रदान करेगा.
The authors have nothing to disclose.
अनुदान दृष्टि के लिए लड़ो द्वारा प्रदान की किया गया था. ऊतकों आयोवा लायंस नेत्र बैंक से प्राप्त किया गया.
Name | Company | Catalog Number |
0.12 forceps | Storz Ophthalmics | E1502 |
5-cc syringe | Becton-Dickinson | 309603 |
Straight Dressing Forceps With Serrations | Storz Ophthalmics | E1400 |
23 gauge needle | Becton-Dickinson | 305145 |
Colibri forceps | Storz Ophthalmics | 2/132 |
Castroviejo angled corneal scissors | Storz Ophthalmics | E3223 |
Vannas Curved Capsulotomy Scissors | Storz Ophthalmics | E3387 |
Weck-Cel surgical spears | Medtronic | 0008680 |
Westcott Curved Tenotomy Scissors | Storz Ophthalmics | E3320 |