En Orthotopic Modell av murina blåscancer
Summary
Tumörer i urinblåsan är etablerade i honmöss i ett minimalt invasiva sätt genom kateterisering, lokala kauterisation, och efterföljande vidhäftning av cancer celler till bränna webbplatser.
Abstract
I detta enkla förfarande, är tumörer i urinblåsan är etablerad i kvinnliga C57 möss med hjälp av kateterisering, lokala kauterisation, och efterföljande celladhesion. Efter deras blåsorna är transurethrally kateter och avrunna, är djur igen kateter för att möjliggöra införandet av en platinatråd i blåsor utan att skada urinröret eller urinblåsan. Den katetrar är gjorda av teflon för att fungera som en isolator för wire, som kommer att utföra elektrisk ström in i urinblåsan för att skapa en brännskada. En diatermi enhet används för att leverera 2,5 W för att den exponerade änden av kabeln, brinnande bort extracellulära lager och ge fastsättning platser för cancer celler som levereras i suspension till urinblåsan genom ett efterföljande kateter. Celler kvar i urinblåsan i 90 minuter, varefter katetrar tas bort och blåsor får rinna naturligt. Utvecklingen av tumören övervakas via ultraljud. Särskild uppmärksamhet fästs vid kateterisering tekniken i den medföljande videon.
Protocol
Discussion
Den här minimalt invasiva metoden för att fastställa orthotopic tumörer i urinblåsan i honmöss kan även tillämpas för celltyper än MB49, trots skilda resultat kan förväntas. När mindre aggressiva tumörceller används kommer att öka effekt något (med 0,5 W steg att upprätta det nya optimala) ger ett område mer mottaglig för tumörceller kvarstad, och längre urinblåsan inkubationstiderna för ingjutit cellerna kommer att ge en större mängd cellbindning vid bränner webbplatser (opublicerade data). ?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Detta arbete har finansierats av National Science Foundation KARRIÄR Award (CBET-0.846.395) och institutionen för komparativ medicin, Tulane University.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| C57Bl/6J mice | Jackson Laboratories | 000664 | 3-5-wk-old | |
| Polycarbonate cages and ventilated rack | Lab Products | Super Mouse 750 | 327mm x 190mm x 143mm |
|
| Hardwood Bedding | Harlan Teklad | Laboratory –grade SaniChips | ||
| Rodent diet | Harlan Teklad | Rodent Diet 2019 | ||
| IV Catheter | MWI | 009231 | 24 G x ¾ in. | |
| Electrocautery unit | Bovie Medical Corporation | Aaron 900 | ||
| Ultrasound unit | Sonosite | 180 Plus (Vet) | ||
| MB49 cell line | Anthony Atala, Wake Forest University Baptist Medical Center | N.A. | ||
| DMEM | Invitrogen | 21063-029 | ||
| Fetal Bovine Serum | Gemini Bio-Products | 100106 500A57B | ||
| Penicillin-Streptomycin | Invitrogen | 15140-163 |
Riferimenti
- Institute of Laboratory Animal Resources. . Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (1996).
- Gunther, J. H., Jurczok, A., Wulf, T., Brandau, S., Deinert, I., Jocham, D. Optimizing syngeneic orthotopic murine bladder cancer (MB49). Cancer Res. 59, 2834-2837 (1999).
- Zhang, X., Atala, A., Godbey, W. T. Expression-targeted gene therapy for the treatment of transitional cell carcinoma. Cancer Gene Ther. 15, 543-552 (2008).
