एक साधारण पर इथेनॉल के sedating प्रभाव को मापने परख<em> ड्रोसोफिला</em> मक्खियों, पलटा ठीक करने के नुकसान पर आधारित है, में वर्णित है.
इथेनॉल के कारण की कम खुराक के लिए अति सक्रिय हो जाते हैं, जबकि उच्च खुराक sedating हैं मक्खियों. एक दिया मक्खी तनाव के इथेनॉल प्रेरित बेहोश करने की क्रिया के लिए संवेदनशीलता कि तनाव इथेनॉल वरीयता के साथ सहसंबद्ध है, और इसलिए बेहोश करने की क्रिया शराब प्रतिक्रियाएं और पीने के आनुवंशिकी के अध्ययन के लिए एक अत्यधिक प्रासंगिक उपाय है. हम मक्खियों को बेनकाब करने के लिए इथेनॉल और उसके मादक प्रभाव को मापने के लिए एक सरल तरीका प्रदर्शित करता है. परख हम वर्णन तीव्र संवेदनशीलता, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से इथेनॉल सहिष्णुता दोहराने जोखिम से प्रेरित निर्धारित कर सकते हैं. यह एक तकनीकी रूप से शामिल सेटअप की आवश्यकता नहीं है, और इसलिए किसी भी प्रयोगशाला में बुनियादी मक्खी संस्कृति उपकरणों के साथ लागू किया जा सकता है.
इस प्रस्तुति में, हम एक सरल पिछले Bainton एट अल द्वारा वर्णित assays पर आधारित इथेनॉल प्रेरित नशा निर्धारित रेखांकित किया है. 1, 2000 और Rothenfluh एट अल. 2006 2. चूंकि शराब प्रेरित बेहोश करने की क्रिया शराब पीने वरीयता 3 के साथ सहसंबद्ध है, इस परख शराब का उपयोग विकारों के अध्ययन के लिए प्रासंगिक है. परख वर्णित डराना प्रेरित नकारात्मक geotaxis पर आधारित है, और कैसे एक शराब जोखिम इस सहज प्रतिक्रिया के साथ हस्तक्षेप. जोखिम शुरू करने से पहले सुनिश्चित करें कि आपके सभी मक्खियों ऐसे डराना के लिए एक सामान्य प्रतिक्रिया दिखाने के लिए, यानी खाद्य शीशी में मक्खियों दोहन करने के बाद, वे सब नीचे से एक 10 सेकंड प्रेक्षण समय के भीतर बढ़ना चाहिए. कम नकारात्मक geotaxis होने मक्खियों के उदाहरण धमाके के प्रति संवेदनशील जब्ती 5 म्यूटेंट, और हरकत की कमी मक्खियों डोपामाइन 6 न्यूरॉन्स के अध: पतन की वजह से शामिल हैं.
हालांकि वर्णित परख अपेक्षाकृत सरल है, दो चर सबसे प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य परिणाम सुनिश्चित करने का ध्यान योग्यता. सबसे पहले, सभी जोखिम शीशियों एक ही मात्रा में होना चाहिए. यह सुनिश्चित करें कि शीशी के नीचे भोजन + गेंद शीशी प्लग / कपास की एक ही मात्रा, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से प्लग इथेनॉल युक्त हर शीशी के लिए एक ही दूरी डालने शामिल बनाने शामिल हैं. इस परख के लिए एक पूरी तरह से खाली शीशी का इस्तेमाल किया जा सकता है, लेकिन यह अब ST50 मूल्यों की ओर जाता है है, परख के throughput कम है.
इस परख भी सहिष्णुता मक्खियों की राशि निर्धारित दोहराने इथेनॉल जोखिम पर विकसित के लिए उपयुक्त है. चर का एक नंबर जब दोहराने जोखिम कर माना जाना चाहिए. सबसे पहले, अंतर – जोखिम अंतराल यहाँ 4 घंटे के रूप में वर्णित है. इस चर, बदला जा सकता है, लेकिन हम अनुशंसा करते हैं कि यह नहीं हो सकता है, 2 घंटे से कम करने के लिए पहली जोखिम से इथेनॉल की निकासी सुनिश्चित है. Scholz एट अल देखें. 4 इथेनॉल सहिष्णुता के विकास और क्षय के कैनेटीक्स के लिए 2000. दूसरा चर पर विचार करने के लिए पहला प्रदर्शन की अवधि है. यह स्पष्ट रूप से नियंत्रण और प्रयोगात्मक मक्खियों के लिए ही होना है. हालांकि, यह इन दोनों उड़ उपभेदों दिया इथेनॉल का एक ही राशि में परिणाम नहीं हो सकता. बेहोश मक्खियों सक्रिय दो मक्खियों की तुलना में अधिक इथेनॉल को अवशोषित, इसलिए एक तनाव है कि पहले एक बाद में sedating तनाव की तुलना में एक उच्च खुराक प्राप्त हो सकता है sedates, और इस प्रकार अधिक एक उच्च प्रारंभिक खुराक की वजह से सहिष्णुता का विकास . हम दृढ़ता से पाठक सावधानी जब उपभेदों कि प्रारंभिक ST50 (1) में मतभेद दिखाने की सहिष्णुता विकास की तुलना.
परख हम यहाँ वर्णन को आसानी से और reproducibly शराब के लिए मक्खियों व्यवहार प्रतिक्रियाओं का निर्धारण करने में एक उपयोगी उपकरण है.
The authors have nothing to disclose.
हम पांडुलिपि के महत्वपूर्ण पढ़ने, और उपयोगी चर्चा के लिए प्रयोगशाला के सदस्यों के लिए Aylin Rodan धन्यवाद. इस शोध एनआईएच, R01AA019526 द्वारा समर्थित है.
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
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Exposure vials | www.flystuff.com | 32-116 | ||
Plugs | www.flystuff.com | 49-102 | ||
Acid Blue 9 | Sigma | 861146 |