Summary

척수 전기 생리학 II : 세포 흡입 전극 제작

Published: February 20, 2011
doi:

Summary

신생아 설치류 척추 코드의 el​​ectrophysiological 녹음을 측정하는 데 사용되는 세포 흡입 전극의 제조 및 사용의 데모<em> 체외에서</em

Abstract

신경 circuitries와 운동의 발전은 신생아 쥐 척수 중앙 패턴 발생기 (CPG) 동작을 이용하여 공부하실 수 있습니다. 우리는 해부 쥐 척수 코드에서 흡입 CPG 활동을 검사하는 데 사용되는 전극, 또는 상상의 운동을 조작하는 방법을 보여줍니다. 설치류 척추 코드는 인공 뇌척수에 배치되고 복부 뿌리는 흡입 전극으로 그려져있다. 전극은 상용 흡입 전극을 수정하여 구성되어 있습니다. 무거운 은색 와이어는 상용 전극에 의해 주어진 표준 와이어 대신 사용됩니다. 상업 전극에 유리 팁은 증가 내구성 플라스틱 팁로 대체됩니다. 우리는 일관성과 재현성있게, 튜빙의 특정 크기로 만들어진 손으로 그린​​ 전극과 전극을 준비합니다. 데이터는 증폭기 및 neurogram 수집 소프트웨어를 사용하여 수집됩니다. 각각, 기계 및 전기 간섭을 방지하기 위해 녹음은 패러데이 케이지 내에서 공기 테이블에 수행됩니다.

Protocol

절연 척추 코드의 Electrophysiological 녹음 신경 회로 1 유전자 및 개발 변경 사항을 확인할 수 있습니다. 우리는 이전에 신생아 마우스 척추 코드 2을 해부하다하는 방법을 보여주었다. 여기 우리는 고립 척추 코드 3 상상의 운동을 기록에 유용 흡입 전극을 준비하는 방법을 제시한다. 플라스틱 튜브 전극의 끝은 저온 알코올 램프 3-5 사용 손으로 …

Discussion

신경 시스템 개발은 격리 쥐 척수 코드를 사용하여 공부하실 수 있습니다. 신경 전달 물질의 존재에 상상의 운동은 패턴 전기 활동을 1,3의 형태로 척수에서 생성할 수 있습니다. 이러한 리듬 파열은 0.2-0.5 Hz에서에서 생산하고 왼쪽, 오른쪽과 flexor – 신근 alternations에서 패턴입니다. 다른 발달 단계에,이 활동의 견고하고 패턴 1 다릅니다. 유전자 변이는 또한이 활동을 3,5,7의</sup…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

사무엘 L. 파프는 생물 학적 연구 솔크 연구소에서 유전자 발현 연구소에서 교수와 하워드 휴즈 의학 연구소의 탐정이다. 이 작품은 크리스토퍼와 다나 리브 재단​​에 의해 지원되었다. 조 Belcovson, 켄트 Schnoeker와 솔크 연구소에서 멀티미디어 자원에 마이크 설리반은 사진 촬영 및 편집 지원을 제공했습니다.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
PTFE Sub Lite Wall Tubing (Small tubing)   Zeus 36AWG 0.005”ID x 0.003” Wall (Small Parts) Also available in 0.003” to 0.006”
Large tubing (0.86mm (0.34”))   Clay Adams Brand Intramedic Becton Dickinson and Company 427420 0.86mm (0.34”) O.D. 1.27mm (.050”)
Electrode Barrel   A-M Systems 573000  
Adhesive   JB Weld    
Adhesive: Silicone caulk        
Solder and soldering iron        
Bleach        
Xylene        
Silver wire: 0.010”   A-M Systems    
Insect pins: Austerlitz 0.1mm   Fine Science Tools 26002-10  
Magnetic Stand   Narishige GJ-8  
Micromanipulator   Narishige MN 151  
Miniboard (Headstage)   Grass Industries F-15EB/B1  
Polyview Adaptor Unit   Grass Industries PVA 8  
Bipolar Portable Physiodata Amplifier System   Grass Industries 15LT  
ANALOG TO DIGITAL CARD   National Instruments 6035E  
Air Table; Vibraplane   Kinetic Systems    

Riferimenti

  1. Gallarda, B. W., Sharpee, T. O., Pfaff, S. L., Alaynick, W. A. Defining rhythmic locomotor burst patterns using a continuous wavelet transform. Ann N Y Acad Sci. 1198, 133-139 (2010).
  2. Meyer, A., Gallarda, B. W., Pfaff, S., Alaynick, W. Spinal cord electrophysiology. J Vis Exp. , (2010).
  3. Gallarda, B. W. Segregation of axial motor and sensory pathways via heterotypic trans-axonal signaling. Science. 320, 233-236 (2008).
  4. Landmesser, L. The development of motor projection patterns in the chick hind limb. J Physiol. 284, 391-414 (1978).
  5. Myers, C. P. Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits. Neuron. 46, 37-49 (2005).
  6. Chanin, M. The determination of chloride by use of the silver-silver chloride electrode. Science. 119, 323-324 (1954).
  7. Goulding, M. Circuits controlling vertebrate locomotion: moving in a new direction. Nat Rev Neurosci. 10, 507-518 (2009).
check_url/it/2580?article_type=t

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Citazione di questo articolo
Garudadri, S., Gallarda, B., Pfaff, S., Alaynick, W. Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication. J. Vis. Exp. (48), e2580, doi:10.3791/2580 (2011).

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