程序性细胞死亡,DNA梯状或TUNEL法检测,如哺乳动物系统常用的检测往往难以重现植物。 GUS报告制度相结合,我们提出一个快速的,植物的瞬态检测,分析特定基因的潜在死亡属性。
我们已经开发出一种新的瞬态植物表达系统,同时表达报告基因β-葡萄糖醛酸酶(GUS)的细胞死亡与公认的积极或消极的监管机构,。在这个系统中,N benthamiana叶渗透与35S驱动的表达,其中包含要分析的基因磁带,GUS载体pCAMBIA 2301使用车辆农杆菌菌株LBA4404。由于活细胞所需的GUS基因表达发生,GUS活性的损失预计时,这个标记基因与细胞死亡的积极监管机构的合作表示。同样,增加的GUS活性是观察时使用抗凋亡基因相比,矢量控制。如下图所示,我们已经成功地在我们的实验室中使用这个系统来分析亲和抗死亡的球员。这些措施包括植物抗凋亡的Bcl – 2的相关athanoGene(袋)的家庭,以及,如BAX已知的哺乳动物的细胞死亡诱导,。此外,我们已经用这个系统来分析具体截断内蛋白质死亡的功能,可提供线索,这些蛋白质可能的翻译后修饰/激活。在这里,我们提出一种快速,敏感的植物为基础的方法,如在初步调查的特定基因的死亡功能第一步。
The authors have nothing to disclose.