Se demuestra en el video de un método para producir una oclusión de arteria cerebral media en ratones adultos con un monofilamento intraluminal. También mostrará cómo evaluar la extensión del infarto cerebral por el cloruro de 2,3,5-trifenil tetrazolio (TTC) tinción.
El accidente cerebrovascular es la más común enfermedad neurológica mortal en los Estados Unidos 1. La mayoría de los accidentes cerebrovasculares (88%) son el resultado de la obstrucción de los vasos sanguíneos en el cerebro (apoplejía isquémica) 2. Como la mayoría de los accidentes cerebrovasculares isquémicos (80%) se producen en el territorio de la arteria cerebral media (ACM) 3, muchos modelos animales tiempos que se han desarrollado se han centrado en esta arteria. El modelo de monofilamento intraluminal de arteria cerebral media oclusión (MCAO) consiste en la inserción de un filamento de cirugía en la arteria carótida externa y los hilos que a la arteria carótida interna (ACI) hasta que la punta ocluye el origen de la MCA, dando lugar a un cese del flujo sanguíneo e infarto cerebral posterior en el territorio de la ACM 4. La técnica puede ser utilizada para modelar la oclusión permanente o transitoria 5. Si la sutura se retira después de un intervalo determinado (30 min, 1 h, o h 2), se logra la reperfusión (transitoria MCAO), si el filamento se deja en su lugar (24 h) el procedimiento es adecuado como un modelo de permanente MCAO . Esta técnica no requiere la craniectomía, un procedimiento neuroquirúrgico para eliminar una parte del cráneo, que puede afectar la presión intracraneal y la temperatura 6. Se ha convertido en el método más frecuentemente utilizado para imitar permanentes y transitorios de isquemia cerebral focal en ratas y ratones 7,8. Para evaluar la extensión del infarto cerebral, que mancha las secciones de cerebro con cloruro de 2,3,5-trifenil tetrazolio (TTC) para identificar el tejido cerebral isquémico 9. En este vídeo, se demuestra el método MCAO y la determinación del tamaño del infarto por tinción con TTC.
MCAO en ratones se utiliza comúnmente para modelo de isquemia cerebral focal en los seres humanos. El uso de ratones para los estudios de tiempos cada vez más frecuente debido a la disponibilidad de las cepas de transgénicos y knock-out. Hay algunos detalles fundamental tener en cuenta en el protocolo:
The authors have nothing to disclose.
Este trabajo fue apoyado por el NIH subvención NS057195, premio UCSF REAC, y Kent State University fondo inicial de WH Chou.
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
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Isoflurane | Chemical | Aerrane, Baxter | 95045-588 | |
V-10 Anesthesia system | Equipment | VetEquip | 901807 | |
TR-200 Temp Controller | Equipment | Fine Science Tools | 21060 | |
Electric clipper | Equipment | Braintree | CLP-9931 | |
Dissecting microscope | Equipment | Nikon | SMZ745T | |
Retractor system | Equipment | Braintree | ACD-014 | |
Bipolar coagulator | Equipment | Howard Instrument | 64000 | |
Silk suture | Material | Harvard Apparatus | 510479 | |
Monofilament suture | Material | Harvard Apparatus | 723351 | |
Vascular clamp | Equipment | Fine Science Tools | 00396-01 | |
Vannas scissor | Equipment | Fine Science Tools | 15000-08 | |
Brain matrix | Equipment | Braintree | BS-2000C | |
2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Chemical | Sigma-Aldrich | T8877 | |
10% neutral buffer formalin | Chemical | Sigma-Aldrich | HT5011 |