Trichuris muris संक्रमण आंत में टाइप 2 प्रतिरक्षण और सूजन के एक मॉडल:
Summary
Trichuris muris संक्रमण Th2 उन्मुक्ति के एक पेट मॉडल जहां प्रतिरोधी चूहों एक सुरक्षात्मक Th2 प्रतिक्रिया पैदा करते हैं और अतिसंवेदनशील चूहों रोग TH1 प्रतिक्रिया उत्पन्न है.
Abstract
Trichuris muris चूहों के एक प्राकृतिक रोगज़नक़ है और जैविक और antigenically Trichuris की प्रजातियों कि मनुष्यों और पशुओं 1 को संक्रमित करने के लिए समान है . संक्रामक अंडे मौखिक gavage, बाहर का छोटी आंत में हैच द्वारा दिया जाता है, आंतों उपकला कोशिकाओं (IECs) पर आक्रमण है कि लाइन cecum और प्रॉक्सिमल बृहदान्त्र के तहखाने और परिपक्वता पर कीड़े 1 वातावरण में अंडे जारी. यह मॉडल कारकों की जांच करने के लिए एक शक्तिशाली उपकरण है कि नियंत्रण CD4 सेल + टी सहायक (गु) के रूप में के रूप में अच्छी तरह से सक्रियण आंत्र उपकला में परिवर्तन. प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया है कि C57BL 6 / और / BALB ग के रूप में प्रतिरोधी जन्मजात उपभेदों में होता है, Th2 polarized (आईएल -4, आईएल -5 और आईएल -13) साइटोकिन्स और कीड़े के निष्कासन जबकि साइटोकिन्स TH1 जुड़े (आईएल द्वारा विशेषता है -12, आईएल -18, IFN-γ) आनुवंशिक रूप से अतिसंवेदनशील AKR / जम्मू 2-6 चूहों में पुराने संक्रमण को बढ़ावा देने. Th2 साइटोकिन्स IECs के कारोबार तेजी से, जाम सेल भेदभाव, भर्ती और उपकला पारगम्यता और चिकनी मांसपेशी संकुचन, जो सभी के कीड़ा निष्कासन 7-15 में शामिल किया गया है में परिवर्तन सहित आंतों microenvironment में शारीरिक परिवर्तन को बढ़ावा देने. यहाँ हम Trichuris muris अंडे जो बाद के प्रयोगों में इस्तेमाल किया जा सकता है प्रचार के लिए एक प्रोटोकॉल विस्तार. हम भी संक्रमण के बाद के विश्लेषण के लिए सुझावों के साथ एक नमूना प्रयोगात्मक फसल प्रदान करते हैं. कुल मिलाकर, इस प्रोटोकॉल बुनियादी उपकरण Trichuris muris माउस संक्रमण मॉडल जो जठरांत्र पथ के रूप में के रूप में अच्छी तरह से IECs की प्रतिरक्षा effector कार्यों में गु प्रवृत्ति से संबंधित सवालों का पता करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है प्रदर्शन के साथ शोधकर्ताओं प्रदान करेगा.
Protocol
Discussion
इस प्रोटोकॉल एक मानक उच्च खुराक तीव्र Trichuris muris संक्रमण है जो अन्वेषक द्वारा अपेक्षित के रूप में संशोधित किया जा सकता है विवरण. उदाहरण के लिए, चूहों और बलिदान किया जा सकता है ऊतकों अलग अलग दिनों पर काटा. …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम के स्वास्थ्य अनुसंधान संस्थान कनाडा MSH (95,368, एमओपी 89,773 और CZ एमओपी – 106,623) और अभिनव के लिए कनाडा फाउंडेशन द्वारा समर्थित किया गया था. SCM गैस्ट्रोएंटरोलॉजी postdoctoral फैलोशिप के एक / CIHR कनाडा के एसोसिएशन के प्राप्तकर्ता है. CZ एक CIHR नई अन्वेषक है.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
|---|---|---|---|
| Animal Feeding Needles (18 x 1½”) | Popper | 7912 | |
| Smooth curved Forceps | Roboz | RS-5047 | |
| DMEM | Gibco | 11965 | |
| NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ (NSG) | Jackson Laboratories | 005557 | These are the mice we used, however, any immunodeficient mice or susceptible strain should work. |
| RNAlater | Qiagen | 76104 | |
| 2 ml tubes | Axygen | MCT-200-C | |
| 15 ml tubes | Falcon | 352096 | |
| 6 well plates | Falcon | 353046 | |
| Paraformaldehyde | Electron Microscopy Science | 15710 | |
| α-RELMβ antibody | PeproTech Inc | 0694270Rb |
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