विच्छेदन तकनीक शीशे, रेटिना, और माउस आँख से लेंस, centrifugation द्वारा जुदाई, और प्रोटीन assays के साथ लक्षण वर्णन के अंतड़ी निकालना दिखाता है.
जबकि माउस रेटिना विरासत में मिला रेटिनल रोग के लिए एक महत्वपूर्ण आनुवंशिक मॉडल के रूप में उभरा है, माउस कांच का पता लगाया जाना रहता है. कांच का एक अत्यधिक जलीय कोशिकी मैट्रिक्स रेटिना जहां के रूप में के रूप में अच्छी तरह से intraocular extraocular प्रोटीन बीमारी के दौरान जमा overlying है शीशे और रेटिना के बीच 1-3 असामान्य बातचीत रेटिना टुकड़ी, proliferative मधुमेह रेटिनोपैथी, uveitis के, और proliferative vitreoretinopathy जैसे कई रोगों आबाद. 1 4 सापेक्षिक माउस शीशे की मात्रा काफी मानव शीशे (चित्रा 1) से छोटा है, माउस लेंस के बाद से अपनी आंख के लगभग 75% occupies 5 यह माउस शीशे के जैव रासायनिक अध्ययन किया गया है चुनौतीपूर्ण. इस वीडियो लेख में, हम काटना और रेटिना, जो ट्रांसजेनिक माउस मॉडल का उपयोग vitreoretinal रोगों के विकास में और अधिक स्पष्ट रूप से इस बाह्य मैट्रिक्स की भूमिका को परिभाषित करने की अनुमति देगा से माउस शीशे अलग तकनीक मौजूद है.
ट्रांसजेनिक चूहों में रेटिना और vitreoretinal रोग की जांच के लिए एक महत्वपूर्ण मॉडल हैं. माउस 6-10 कांच का शरीर, तथापि, मानव माउस आंख में बड़े लेंस की वजह से शीशे का की तुलना में आँख के एक काफी छोटे अनुपात शामिल हैं 5. इससे यह मुश्किल और अलग करने के लिए और माउस कांच का शुद्ध. प्रोटीन proliferative मधुमेह रेटिनोपैथी, आयु से संबंधित धब्बेदार अध: पतन, uveitis के, और रेटिना टुकड़ी जैसे रोगों के दौरान शीशे के साथ जुड़े परिवर्तन को समझना तंत्र में अंतर्दृष्टि दे देंगे जिसके द्वारा वे प्रगति. यह कल्पना की प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल प्राप्त करने के लिए और माउस कांच का शरीर को शुद्ध करने का साधन प्रदान करता है, जबकि enzymatic और प्रोटिओमिक विश्लेषण के लिए प्रोटीन उपज को अधिकतम.
The authors have nothing to disclose.
अनुदान दृष्टि और अंधापन रोकने के अनुसंधान के लिए लड़ो द्वारा प्रदान की गई थी.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
---|---|---|---|
15°, BD Beaver Microsurgical Blade | Becton-Dickinson | 374881 | |
PBS, pH 7.4 | Invitrogen | 70011-044 | |
0.22 Fine-Castroviejo Suturing Forceps | Storz Ophthalmics | E1805 | |
0.12 Colibri forceps | Storz Ophthalmics | 2/132 | |
Microcon Centrifugal Filter Ultracel YM-100 or YM-50 | Millipore | 42412, 42415 | |
SOD Activity Colorimetric Assay Kit | Abcam | Ab65354 | |
Weck-Cel surgical spears | Medtronic | 0008680 | |
Protease inhibitor cocktail | Roche | 11 836 170 001 | |
Flamingo fluorescent gel stain | Bio-Rad | 161-04910 |