Método de aglutinación de partículas para la identificación de poliovirus
Summary
Una partícula desarrollado recientemente la novela de aglutinación (PA) de ensayo utilizando virus molécula del receptor permite una identificación rápida y fácil de poliovirus (PV). En este artículo vamos a mostrar el procedimiento para el ensayo de PA para la identificación de PV.
Abstract
En la Iniciativa de Erradicación Mundial, el diagnóstico de laboratorio desempeña un papel fundamental mediante el aislamiento y la identificación de PV de las muestras de heces de parálisis flácida aguda (PFA). En la Organización Mundial de la Salud (OMS), la Red de Laboratorios Mundial de la Poliomielitis, el aislamiento y la identificación PV están llevando a cabo mediante el sistema de cultivo celular y en tiempo real RT-PCR, respectivamente. En la era posterior a la erradicación de la energía fotovoltaica, los procedimientos de identificación simple y rápida sería de gran ayuda para la rápida confirmación de casos de polio en los laboratorios nacionales. En el presente estudio, vamos a mostrar el procedimiento de ensayo de la novela de PA desarrollado para la identificación de PV. Este ensayo PA utiliza la interacción de la energía fotovoltaica receptor (PVR) y el virión molécula que es la afinidad específica y uniforme para todos los serotipos de la energía fotovoltaica. El procedimiento es sencillo (un procedimiento de paso en las placas de reacción) y rápido (los resultados se pueden obtener dentro de las 2 h de reacción), y el resultado es visualmente observado (observación de la aglutinación de partículas de gelatina).
Protocol
Discussion
El único punto de este ensayo PA es la utilización de la molécula de PVR en lugar de anticuerpos anti-PV para la detección de FV 2. Esto permite una interacción específica de las partículas sensibilizadas con gelatina de PV con una afinidad uniforme para los tres serotipos de la energía fotovoltaica 3-6. Se utilizó un formulario de inmunoadhesina de PVR (PVR-IgG2a) para la sensibilización de las partículas de gelatina, ya que las formas monoméricas de PVR sólo tienen afinidades moderada al sitio …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Estamos muy agradecidos a Junko Wada por su excelente asistencia técnica. Estamos agradecidos con el profesor Akio Nomoto de la amabilidad de ofrecer un vector de expresión de baculovirus para el PVR-IgG2a. Este estudio fue apoyado en parte por subvenciones-en-Ayudas a la Promoción de la Erradicación de la Poliomielitis y la Investigación Emergentes y Re-emergentes enfermedades infecciosas del Ministerio de Salud, Trabajo y Bienestar Social.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
|---|---|---|---|
| Sensitized-gelatin particles | Fujirebio Inc. | Test kit | |
| Reconstitution buffer | Fujirebio Inc. | Test kit | |
| Microtitration plate | Fujirebio Inc. | Test kit | |
| Anti-PV antibody | RIVM |
Riferimenti
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