Summary

盲腸結紮穿刺手順

Published: May 07, 2011
doi:

Summary

人間の敗血症の研究のための貴重なツールとして、盲腸結紮穿刺のマウスモデル。

Abstract

人間の敗血症は、ローカルホストによって含まれていることに失敗した集中的かつ大規模な感染に応答して、全身反応のセットによって特徴付けられる。現在、米国集中治療室1の死亡率のトップ10に名の間で敗血症のランク。敗血症時には重複する可能性が確立された2つの血行動態のフェーズがあります。初期段階は(亢進)マクロファージと血管透過性(低血圧につながる)、心機能に影響を及ぼし、組織の壊死や臓器不全​​で最高潮に達する代謝の変化を誘発する好中球による炎症性サイトカインや活性酸素種の大規模な生産として定義されています。その結果、死亡率の最も一般的な原因は、急性腎障害である。第2フェーズが(hypodynamic)改変された単球、抗原提示を含む抗炎症プロセスであり、リンパ球の増殖および機能とアポトーシスの増加を減少させた。免疫抑制や免疫抑うつと呼ばれるこの状態は急激にnocosomial感染し、最終的に、死のリスクを増大させる。これらの病態生理学的プロセスのメカニズムは十分に特徴付けされていません。敗血症の両方のフェーズでは不可逆的と取り返しのつかない損傷を与える可能性があるので、それは患者の免疫学的および生理学的状態を判断するために不可欠です。これは、多くの治療薬が失敗した主な理由です。敗血症のさまざまな段階で与えられた同じ薬剤は、治療またはその他の有害な場合または効果2,3がないかもしれません。さまざまなレベルで敗血症を理解するには、疾患の臨床経過を再現した適切かつ包括的な動物モデルを持つことが重要です。敗血症時に発生する病態生理学的メカニズムを特徴づけるし、潜在的な治療薬をテストするためのモデルの条件を制御することが重要です。

人間の敗血症の研究者の病因を研究するために別の動物モデルを開発しました。最も広く使用されている臨床モデルでは、盲腸結紮穿刺(CLP)です。 CLPモデルでは、腹腔内に糞便材料のリリースでは、複数菌感染により誘導される悪化免疫応答を生成できるように盲腸の穿孔から構成されています。このモデルは、臨床的に関連している人間の条件を満たしています。人間のように、流体蘇生でCLPを受けるマウスは、時間に秒(後期)hypodynamic段階に進行する最初(初期)亢進相を示す。さらに、サイトカインプロフィールは、リンパ球アポトーシスを(4,5でレビューさ)が増大されている場所、人間の敗血症で見られるものと似ています。敗血症に関与し、複数のと重複するメカニズムにより、研究者が一貫して再現性のある結果を得るために制御された重篤度の適切な敗血症モデルを必要としています。

Protocol

1。ヒト敗血症のマウスモデルとして盲腸結紮穿刺この手順のC57BL / 6マウスのために(7-9週齢)に使用されています。 腹腔内に1時01分ケタミン(75mg/kg)とキシラジン(15mg/kg)の溶液を注入することにより、マウスを麻酔。参考として、20グラムのマウスに1:1溶液30μlを注入する。また、マウスは、麻酔薬の気化器を用いて吸入イソフルランで麻酔をすることがで?…

Discussion

ここでは、マウスにCLPモデルを実行する方法を詳細に示し、重症度を調節している。

敗血症の他の動物モデルと比較すると、CLPは、異なる年齢と性別のいずれかのマウス系統で行うことができます。それは比較的簡単で安価な手術です。このモデルでは、重症度のグレードは、生存の割合に直接影響を与えます。ライゲーションの長さ、針の太さとパンクの数は、CLPの?…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この作品は、健康のペンシルバニア部からの助成金によって支えられて。
博士ミゲルガルシアトスカーノはこの調査中にアルフォンソマルティンエスクデロ財団が資金提供テンプル大学でポスドクだった。
我々は、ビデオの製作のためにIliya YordanovとケビンKotredesに感謝したいと思います。

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Ketamine Ketaset 0856-2013-01  
Xylazine AnaSed NADA# 139-236  
Insulin syringe 29G Exel 26028  
Silk suture, 6-0 PROLENE Ethicon 8680G  
19G and 25G Needle BD 305186  
Shaver General supply General supply  
Infrared Heating lamp General supply General supply  
Michel wound clips 7mm Roboz Surgical Instr RS-9270  
Ear Loop Mask Fisher Scientific 19-130-4181  
Dissection scissors Roboz Surgical Instr RS-6702  
Betadine solution VWR 63410-992  
Surgical forceps Roboz Surgical Instr RS-5135  
70% Isopropyl alcohol pad Fisher Scientific 22-031-350  
Buprenorphine Bedford Labs 55390-100-10  
Tramadol Sigma-Aldrich 42965  

Riferimenti

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Citazione di questo articolo
Toscano, M. G., Ganea, D., Gamero, A. M. Cecal Ligation Puncture Procedure. J. Vis. Exp. (51), e2860, doi:10.3791/2860 (2011).

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