Intraluminali occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO) Modello per l'ictus ischemico con la guida flussimetria laser Doppler in topi
Summary
Il intraluminale occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO) modello è il modello più frequente tra i modelli sperimentali utilizzati ictus ischemico. Qui dimostrerà tutto il modello in dettaglio con la guida di flussimetria laser Doppler, ed i suoi risultati rappresentativi.
Abstract
L'ictus è la terza causa di morte e la principale causa di disabilità nel mondo, con un costo stimato di quasi 70 miliardi dollari negli Stati Uniti nel 2009 1,2. Il intraluminale occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO) il modello è stato sviluppato da Koizumi 4 nel 1986 per simulare questa patologia di forte impatto umano nel ratto. Una modifica del metodo di MCAO è stato poi presentato dalla Longa 3. Entrambe le tecniche sono stati ampiamente utilizzati per identificare i meccanismi molecolari delle lesioni cerebrali da ictus ischemico e potenziali modalità terapeutiche 5. Questo metodo relativamente non invasivo nei ratti è stata estesa da utilizzare nei topi per sfruttare ceppi transgenici e knockout 6,7. Per modello di ischemia cerebrale focale, una sutura intraluminale è avanzato attraverso l'arteria carotide interna per occludere la base del MCA. Ritraendo la sutura dopo un determinato periodo di tempo imita riperfusione spontanea, ma la sutura può essere mantenuto in permanenza. Questo video sarà dimostrare i due principali approcci per l'esecuzione di intraluminale procedura MCAO nei topi in modo graduale, oltre a fornire spunti per potenziali svantaggi e le insidie. Il tessuto cerebrale ischemico sarà successivamente colorate con 2,3,5-trifeniltetrazolio cloruro (TTC) per valutare il grado di infarto cerebrale 8.
Protocol
Discussion
Il modello MCAO è un modello stabilito che replica ischemia cerebrale in specie murina. Questo modello è stato utilizzato nel ratto e successivamente adattato alle topi. Evitare craniectomia per eliminare l'influenza di manipolazione chirurgica sulla permeabilità della barriera emato-encefalica e della pressione intracranica è un vantaggio di questa tecnica. Tuttavia, molte variabili, come il ceppo differenze legate al 10, dimensioni della punta di sutura 11, durata dell'occlusione <sup…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Name of the reagent | Tipo | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
|---|---|---|---|---|
| Male C57BL/6 mice | Animal | Harlan Laboratories, Indianapolis, IN, USA | 20-26 grs | |
| Dissection microscope | Microscope | Leica stereo Microscope MZ6 | 6.3:1 zoom | |
| Fiber optic illuminator | Illuminator | TechniQuip Corp., Livermore, CA, USA | FO1–150 | |
| Isoflurane | Anesthesia | Baxter Pharmaceutics, Deerfield, IL | 1001936060 | |
| SuperCut Iris scissor, straight | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14218 | |
| Vannas micro-scissor, straight | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14003 | |
| Dumont fine tip forceps | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 503290 | |
| Vessel clip | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14120 | |
| High Frequency Desiccator 900 | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 500397 | |
| 7-0 surgical Nylon monofilament suture | Suture | Ethicon, Inc., Somerville, NJ, USA | 1647G | Suture for occlusion |
| 7-0 surgical Silk suture | Suture | Ethicon, Inc., Somerville, NJ, USA | 7733G | Suture for ligation |
| Silicone RTV adhesive | Silicone rubber | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 1571 | |
| Vetbond | Tissue adhesive | 3M Company, St Paul, MN, USA | 70200746587 | |
| Puralube Vet Ointment | Eye ointment | Pharmaderm, Melville, NY, USA | ||
| Buprenorphine hydrochlorode | Analgesics | Hospira Inc., Lake Forest, IL, USA | NDC 0409-2012-32 | |
| Thermal Cautery Unit | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 501292 | ||
| PeriFlux System 5000 | TCD flowmetry | Perimed, Stockholm, Sweeden | ||
| BAT-12 | Rectal thermometer | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | BAT-12R | |
| T/PUMP, TP600 | Thermal blanket | Gaymar, NY, USA | ||
| 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Reagent | Sigma-Aldrich Co., St Louis, MO, USA | T8877 | |
| Mice brain matrix slicer | Brain slicer | Zivic-Miller Lab., Inc., Allison Park, PA, USA | BSMAS001-1 |
Riferimenti
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