व्हार्टन वाहिनी के माध्यम से माउस अवअधोहनुज लार ग्रंथि की Cannulation
Summary
व्हार्टन वाहिनी के माध्यम से माउस अवअधोहनुज लार ग्रंथि की cannulation के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन है. इस प्रयोग के लिए, trypan नीले समाधान एक डायर के रूप में प्रयोग किया जाता है प्रदर्शित करने के लिए कैसे इस तकनीक को प्रभावी ढंग से लक्षित ग्रंथि में सुई लेनी पहुँचाती है, और लार की गिल्टी के उत्थान के लिए एक संभावित नैदानिक दवा / सेल थेरेपी के रूप में इस नए दृष्टिकोण की विश्वसनीयता का सुझाव.
Abstract
गंभीर लार ग्रंथि hypofunction अक्सर Sjögren सिंड्रोम और जो उनके सिर और गर्दन के क्षेत्रों में कैंसर के इलाज के लिए चिकित्सीय विकिरण प्राप्त उन के साथ रोगियों में पाया जाता है. रोगियों (शुष्क मुँह) xerostomia, dysphagia (बिगड़ा चबाने और निगलने) के रूप में अनुभव के लक्षणों के दोनों गुटों, गंभीर दंत क्षय, बदल स्वाद, ऑरो ग्रसनी संक्रमण (कैंडिडिआसिस), mucositis, दर्द और बेचैनी.
Hypo समारोह लार ग्रंथि के उपचार के लिए पुनर्योजी चिकित्सा के एक नवीन दृष्टिकोण रुपये Redman, ई Mezey एट अल 2009 में अनुमान लगाया है: स्टेम सेल ग्रंथि में सीधे जा सकता है cannulation द्वारा बिगड़ा के कार्यों को पुनर्जीवित करने में एक शक्तिशाली विधि के रूप में जमा अंग. मुमकिन है, माइग्रेट विदेशी स्टेम कोशिकाओं ग्रंथियों कोशिकाओं मेजबान लार ग्रंथि के हिस्से के रूप में समारोह में अंतर होगा. इसके अलावा, इस cannulation तकनीक नैदानिक जीन स्थानांतरण आवेदन के लिए एक समीचीन और प्रभावी वितरण पद्धति है.
यहाँ हम व्हार्टन वाहिनी (चित्र 1) के माध्यम से माउस अवअधोहनुज लार ग्रंथि पर cannulation प्रक्रिया प्रदर्शन में शामिल कदम वर्णन. C3H चूहों (चार्ल्स नदी, मॉन्ट्रियल, QC, कनाडा), जो मैकगिल विश्वविद्यालय पशु संसाधन केन्द्र पर साफ पारंपरिक शर्तों के तहत रखा गया है इस प्रयोग के लिए इस्तेमाल किया जाता है. सभी प्रयोगों विश्वविद्यालय के पशु की देखभाल समिति द्वारा अनुमोदित किया गया है और जानवर की देखभाल पर कनाडा परिषद के दिशा निर्देशों के साथ अनुसार में थे.
इस प्रयोग के लिए, एक trypan नीले समाधान ग्रंथि में व्हार्टन वाहिनी के उद्घाटन के एक polyethylene ट्यूब के अंदर encased एक 29 गेज सुई के साथ एक इंसुलिन सिरिंज का उपयोग कर के माध्यम से संचार होता है. इसके बाद, माउस को दिखाने के लिए कि सुई लेनी ग्रंथि में सफलतापूर्वक माइग्रेट dissected है.
Protocol
Discussion
कठिनाई इस cannulation पद्धति का उपयोग करके इंजेक्शन समाधान की backflow को रोकने है. यहां तक कि अगर trypan नीले समाधान अस्थायी रूप से लार ग्रंथि में सफलतापूर्वक माइग्रेट, लार स्राव सुई लेनी के साथ हस्तक्षेप और trypan नीले …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
लेखक डॉ. एना Cotrim तकनीकी परामर्श के लिए और उपकरणों के लिए Murshed डा. Monzur आभारी हैं. इस काम के हिस्से में स्वास्थ्य अनुसंधान संस्थान कनाडा के लिए द्वारा वित्त पोषित किया गया था.
Materials
| Name of the reagent | Type | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Atropine | Drug | Fluka | 11330 | To inhibit saliva secretion |
| Ketamine | Drug | Phoenix Scientific | Sedation | |
| Xylazine | Drug | Phoenix Scientific | ||
| Polyethylene tubing (0.58 mm diameter) | Tube | Intramedic PE-10, Becton Dickinson Diagnostic Systems | 427410 | To insert over tip of needle to avoid tissue injury during insertion into Wharton’s duct. |
| Ultra Comfort Insulin syringe (with a 29G needle) | Syringe | Tyco Healthcare | 600145 | |
| 4% trypan blue | Stain | Gibco | 15250 |
References
- Fox, P. C. Acquired salivary dysfunction. Drugs and radiation. Ann N Y Acad Sci. 842, 132-137 (1998).
- Bhide, S. A., Miah, A. B., Harrington, K. J., Newbold, K. L., Nutting, C. M. Radiation-induced xerostomia: pathophysiology, prevention and treatment. Clin Oncol (R Coll Radiol). 21, 737-744 (2009).
- Redman, R. S., Ball, W. D., Mezey, E., Key, S. Dispersed donor salivary gland cells are widely distributed in the recipient gland when infused up the ductal tree. Biotech Histochem. 84, 253-260 (2009).
