ワルトン管を経由してマウス顎下唾液腺のカニュレーション
Summary
ワルトン管を介してマウス顎下唾液腺のカニュレーションのためのプロトコルが記述されています。この実験では、トリパンブルー溶液は、この手法が効果的に標的腺に注入を提供する方法を示すこと、および唾液腺の再生のための潜在的な臨床薬/細胞療法としてのこの新しいアプローチの信頼性を示唆するダイアーとして使用されます。
Abstract
重度の唾液腺の機能低下が頻繁にシェーグレン症候群と癌治療のために彼らの頭頸部領域での治療照射を受けている人の患者に見られる。このような口腔乾燥（口渇）、嚥下障害（咀嚼や嚥下障害）などの患者の経験の症状の両方のグループ、重度の虫歯、味覚変化、オーロ-咽頭感染症（カンジダ症）、粘膜炎、痛みや不快感。
唾液腺の低刺激機能の治療のための再生医療の一つの革新的なアプローチはRSレッドマン、E Mezey ら推測される2009：。幹細胞を直接障害の機能を復活さで強力な方法として、グランドにカニュレーションによって堆積することができるオルガン。おそらく、移行した外国の幹細胞は、宿主唾液腺の一部として機能する腺細胞に分化する。また、このカニューレ挿入法は、臨床的遺伝子導入のアプリケーションのための方便と効果的な配信方法です。
ここでは、ワルトン管（ 図1）を経由してマウスの顎下唾液腺にカニュレーションの手順を実行するために必要な手順を示しています。 C3Hマウス（チャールズリバー、モントリオール、QC、カナダ）は、マギル大学動物資源センターでクリーンな、従来の条件下で保持されているこの実験に使用されます。全ての実験は、大学の動物ケア委員会によって承認され、動物のケアに関するカナダの協議会のガイドラインに準拠していましたされています。
この実験では、トリパンブルー溶液を29ゲージの針ポリエチレン管の内側に包まれてインスリンの注射器を使用してワルトン管の開口部を介してグランドに注入する。その後、マウスは注入が正常腺に移行することを示すために解剖される。
Protocol
Discussion
このカニューレ挿入法を使用して難しさは、注入溶液の逆流を防ぐためです。トリパンブルー溶液を一時的に正常唾液腺に移行した場合でも、唾液の分泌は、注入を妨害し、腺の外トリパンブルー液の逆流が発生する場合があります。予防策として、唾液の分泌を抑制するためにアトロピンの使用に加え、ポリエチレンカニューレは、ワルトン管や点滴が堆積された後、60秒間保持シリンジ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
著者は、技術的な相談のための博士アナCotrimへと機器のMurshed博士Monzurに感謝しています。この作品は、部分的に保健研究のためのカナダの協会によって資金を供給された。
Materials
| Name of the reagent | Type | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Atropine | Drug | Fluka | 11330 | To inhibit saliva secretion |
| Ketamine | Drug | Phoenix Scientific | Sedation | |
| Xylazine | Drug | Phoenix Scientific | ||
| Polyethylene tubing (0.58 mm diameter) | Tube | Intramedic PE-10, Becton Dickinson Diagnostic Systems | 427410 | To insert over tip of needle to avoid tissue injury during insertion into Wharton’s duct. |
| Ultra Comfort Insulin syringe (with a 29G needle) | Syringe | Tyco Healthcare | 600145 | |
| 4% trypan blue | Stain | Gibco | 15250 |
References
- Fox, P. C. Acquired salivary dysfunction. Drugs and radiation. Ann N Y Acad Sci. 842, 132-137 (1998).
- Bhide, S. A., Miah, A. B., Harrington, K. J., Newbold, K. L., Nutting, C. M. Radiation-induced xerostomia: pathophysiology, prevention and treatment. Clin Oncol (R Coll Radiol). 21, 737-744 (2009).
- Redman, R. S., Ball, W. D., Mezey, E., Key, S. Dispersed donor salivary gland cells are widely distributed in the recipient gland when infused up the ductal tree. Biotech Histochem. 84, 253-260 (2009).
