Angiogenesis 연구에 대한 각막 포켓 분석의 마우스 모델
Summary
각막은 혈관 조직이 부족한다는 점에서 고유합니다. 그러나, 강력한 혈관의 성장과 생존은 강력한 angiogenic 요인에 의해 각막에 유도된 수 있습니다. 따라서 각막이 우리와 함께 angiogenic 연구 가치있는 도구를 제공할 수 있습니다. 이 프로토콜은 각막 포켓 분석 방법과이 모델을 사용 angiogenic 요인에 의해 유발 angiogenesis을 평가의 마우스 모델을 수행하는 방법을 보여줍니다.
Abstract
정상 각막은 혈관 조직이 분명하다. 그러나 혈관이 강력한 angiogenic 요인이 1을 투여하는 각막의 성장과 생존을 유도하실 수 있습니다. 이 독특한는 각막 포켓 분석 angiogenesis 연구에 대해 가장 많이 사용되는 모델 중 하나가되었다. 각막은 세포의 여러 레이어를 작곡. 그것은 angiogenic 효과 2,3를 조사하기 위해 각막에 대한 관심의 angiogenic 요인을 포함한 펠렛를 포함하는 것이 가능합니다. 여기, 우리는 (I)는 angiogenic 요인 함유 펠렛 (II)을 (III)의 관심 angiogenic 요인에 의해 유발 angiogenesis를 분석 각막에 펠렛을 포함을 생산하는 방법의 단계 시범에 의해 단계를 제공합니다. 기본 fibroblast의 성장 인자 (bFGF)가 가장 강력한 angiogenic 요인 4의 하나로 알려져 있기 때문에, 그것은 각막에 angiogenesis를 유도 여기에 사용됩니다.
Protocol
Discussion
마우스 각막 포켓 분석 모델을 먼저 Muthukkaruppan VR 및 아우어 바흐 R 6 1979 년에 설명했다. 자세한 프로토콜은 다른 실험실 2,3,7,8에 의해 공개되었습니다. 저희 연구실은 몇 년 4 수정 및 우리의 연구에이 방법을 사용하고 있습니다. 마우스 각막 포켓 검정 좋은 재현성있는 비교적 간단한 모델입니다. 이 모델의 또 다른 장점은 각막이 정상적으로 혈관 부족 때문에,이 분석의 …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
우리의 연구는 NIH, 국립 안과 연구소의 교내 연구 프로그램에 의해 지원됩니다.
Materials
| Equipment | Company | Catalog number |
|---|---|---|
| Dissecting microscope | World Precision Instruments | PZMIV-BS |
| Von Graefe cataract knife (1.5x25mm blade, flat) | Ambler Surgical | 3401E |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11252-50 |
| Slit lamp | Zeiss | 30 SL-M |
Table 1. Equipments
| Reagent | Company | Catalog# | Comments |
|---|---|---|---|
| bFGF (basic fibroblast growth factor) | PEPROTECH INC. | 100-18B | |
| Sucralfate (Sucrose octasulfate–aluminum complex) | Sigma | S0652 | 10% in PBS |
| poly-HEMA (Poly(2-hydroxyethyl methacrylate)) | Sigma | P3932 | 12% in Ethanol |
Table 2. Reagents and materials
Riferimenti
- Cao, Y., Linden, P., Shima, D., Browne, F., Folkman, J. In vivo angiogenic activity and hypoxia induction of heterodimers of placenta growth factor/vascular endothelial growth factor. The Journal of clinical investigation. 98, 2507-2511 (1996).
- Rogers, M. S., Birsner, A. E., D’Amato, R. J. The mouse cornea micropocket angiogenesis assay. Nature. 2, 2545-2550 (2007).
- Poche, R. A., Saik, J. E., West, J. L., Dickinson, M. E. The mouse cornea as a transplantation site for live imaging of engineered tissue constructs. Cold Spring Harbor protocols. , 5416-54 (2010).
- Zhang, F. VEGF-B is dispensable for blood vessel growth but critical for their survival, and VEGF-B targeting inhibits pathological angiogenesis. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. , 106-6152 (2009).
- Tong, S., Yuan, F. Dose response of angiogenesis to basic fibroblast growth factor in rat corneal pocket assay: I. Experimental characterizations. Microvascular research. 75, 10-15 (2008).
- Muthukkaruppan, V., Auerbach, R. Angiogenesis in the mouse cornea. Science. 205, 1416-1418 (1979).
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- Ziche, M., Morbidelli, L. The corneal pocket assay. Methods in molecular biology. 467, 319-329 (2009).
