このビデオでは、我々は、投稿の微細加工の配列を使用して細胞牽引力を測定するために我々のアプローチを紹介します。牽引力は、ミオシン – アクチンの相互作用を通して生成され、私たちの生理機能に重要な役割を果たしています。開発中に、彼らは、細胞が組織の初期構造を形成する1つの場所から順番に次のに移動することができます。牽引力は治癒のプロセスに役立つ。彼らは傷の適切な閉鎖または私達の体を介して移行し、白血球のクロールに必要です。これらの同じ力は、癌の転移や腫瘍に向かって血管の成長の場合には私たちの健康に有害であることができる。 in vitroで細胞を研究するために使用される、最も一般的な方法は、ガラスまたはポリスチレン皿を使用してきました。しかし、基板の剛性は、それが不可能な物理的に細胞の牽引力を測定すること、および牽引力を研究するために、比較的少数の方法があります。私たちの研究室では、これらの制限を克服する技術を開発しました。方法は、柔軟なカンチレバーの垂直配列、個々の細胞は多くのカンチレバーに分散し、その過程で、それらを偏向するようであるの剛性とサイズのスケールに基づいています。我々が使用する柱は、10μmの高さ、直径3μmの、であり、および9μmの中心間距離との定期的な配列で構成されています。しかし、これらの物理的な寸法は、容易に様々な研究に対応するために変化させることができます。我々は、シリコンのマスターで始まりますが、最後のポストは、ポリ(ジメチルシロキサン)、またはPDMSと呼ばれるシリコーンゴムから作られています。我々は、顕微鏡下でたわみを測定し、観測された変形を作成するために必要な牽引力の大きさと方向を計算することができます。我々は、これらのポストアレイディテクタ微細加工基板、またはmPADsを呼び出します。ここで、我々は細胞の収縮性の変調を評価するためにmPADsを作製および使用方法を説明します。
Desai, R. A., Yang, M. T., Sniadecki, N. J., Legant, W. R., Chen, C. S. Microfabricated Post-Array-Detectors (mPADs): an Approach to Isolate Mechanical Forces. J. Vis. Exp. (8), e311, doi:10.3791/311 (2007).