Сообщение Microfabricated-Array-детекторы (ПЗРК): Подход к изолят механических сил
Summary
В этом видео показано, как изготовить и использовать microfabricated сообщение детекторов массива (ПЗРК) с целью оценки модуляции клеточного сократимость.
Abstract
В этом видео мы представим наш подход для измерения силы тяги сотовой использованием microfabricated массив сообщений. Тяговые силы возникают через миозина-актина взаимодействия и играют важную роль в нашей физиологии. Во время разработки, они позволяют клеткам перемещаться из одного места к другому в целях формирования ранней структуры ткани. Тяговые силы помогают в исцелении процессов. Они необходимы для надлежащего закрытия раны или миграции и ползающих лейкоцитов через наше тело. Те же самые силы могут быть вредными для нашего здоровья и в случае метастазов рака или сосудистых рост по отношению к опухоли. Наиболее распространенным методом для изучения клеток в пробирке в том, чтобы использовать стеклянную или полистирола блюдо. Тем не менее, жесткость подложки делает невозможным физически мера ячейки силы тяги, и Есть относительно немного методов исследования тяговых усилий. Наша лаборатория разработала технику, чтобы преодолеть эти ограничения. Метод основан на вертикальный ряд гибких консолей, жесткость и размер масштаб которых таковы, что отдельные клетки распространяются во многих консолей и отразить их в процесс. Столбы которые мы используем, 3 мкм в диаметре, 10 мкм в высоту и настраиваются в обычный массив с 9 мкм от центра до центра интервала. Но эти физические размеры можно легко изменить для учета различных исследований. Начнем с мастером кремния, но окончательные сообщения сделаны из силиконовой резины, которая называется поли (диметил силоксан), или PDMS. Мы можем измерить отклонения под микроскопом, и рассчитать величину и направление тяговых усилий, необходимых для производства наблюдается отклонений. Мы называем эти субстраты microfabricated пост-массива детекторов, или ПЗРК. Здесь мы покажем вам, как мы изготавливаем и использования ПЗРК для оценки модуляции клеточного сократимость.
Protocol
Riferimenti
- Tan, J. L., Tien, J., Pirone, D., Gray, D. S., Chen, C. S. Cells lying on a bed of microneedles: An approach to isolate mechanical force. Proc Nat Acad Sci USA. 100, 1484-1489 (2003).
- Sniadecki, N. J., Chen, C. S., Wang, Y. L., Discher, D. E. Microfabricated Silicone Elastomeric Post Arrays for Measuring Traction Forces of Adherent Cells. Methods in Cell Biology – Cell Mechanics. 83, 313-328 (2007).
- Lemmon, C. A., Sniadecki, N. J., Ruiz, S. A., Tan, J. T., Romer, L. H., Chen, C. S. Shear Force at the Cell-Matrix Interface: Enhanced Analysis For Microfabricated Post Array Detectors. Mechanics & Chemistry of Biosystems. 2, 1-16 (2005).
