התכווצות העורקים mesenteric ללימודי הרפיה באמצעות Myography בנקאית אוטומטית
Summary
שיטה myography אוטומטית עבור מדידות כוח בעורקים mesenteric מבודד מתואר. היא מעסיקה Mulvany-Wire הלפרן כפול אוטומטי Myograph 510A לקבוע התגובות phenylephrine וסידן תאיים. השיטה מאפשרת קביעת עקבית של תגובות איזומטרי כדי אגוניסטים בכלי קטן של קטרים של 6-30 מיקרומטר, באופן עצמאי.
Abstract
כלי ההתנגדות הפרוקסימלי, כמו עורקי mesenteric, לתרום באופן משמעותי את התנגדות היקפית. אלו כלי קטן של בין 100-400 מיקרומטר בתפקוד בקוטר בעיקר בהכוונת זרימת הדם לאיברים שונים בהתאם לדרישות הכללית של הגוף. עורק mesenteric עכברוש בעל קוטר גדול מ 100 מיקרומטר. הטכניקה myography, שתוארה לראשונה על ידי Mulvay ו הלפרן 1, היה מבוסס על השיטה המוצעת על ידי ביוון אושר 2. הטכניקה מספק מידע על כלי קטן בתנאים איזומטרי, שם קיצור משמעותי של הכנה השריר נמנעת. מאז ייצור כוח ורגישות כלי כדי אגוניסטים שונים תלויה מידת המתיחה, על פי היחס מתח באורך פעיל, חשוב לבצע מחקרים כיווץ איזומטרי בתנאים כדי למנוע קיום של חוטים גובר. חוטי נירוסטה הם העדיפו חוטי טונגסטן בשל חמצון של האחרונה, אשר משפיע על התגובות רשמה 3. הטכניקה מאפשרת השוואה של אגוניסט-Induced להתכווצויות של כלי רכוב להשיג ראיות לתפקוד תקין של כלי דם לקולטנים המצויים בתאי שריר חלק.
הראינו במספר מחקרים כי העורקים mesenteric מבודדים כי הם התקשרה עם phenylyephrine להירגע על תוספת של ריכוז מצטבר של תאי סידן (Ca 2 + e). הממצאים הובילו אותנו למסקנה כי עצבי התחושה perivascular, אשר מבטאים את G-חלבון בשילוב Ca 2 + חישה קולטן (CAR), לתווך את התגובה הזאת vasorelaxation. באמצעות שיטה אוטומטית myography תיל, אנו מציגים כאן העורקים mesenteric מ Wistar, דאל מלח רגיש (DS) ו דאל מלח עמידים (DR) חולדות מגיבים באופן שונה Ca 2 + דואר. רקמות של חולדות Wistar הראה Ca 2 + גבוה יותר רגישות בהשוואה לאלו של DR ו DS. ביטוי רכב מופחתת בעורקים mesenteric מ DS חולדות בקורלציה עם הקטינה Ca 2 + e-Induced הרפיה של בודדים, טרום חוזה העורקים. הנתונים מראים כי הרכב נדרש הרפיה של העורקים mesenteric תחת הטון adrenergic מוגברת, כפי שקורה יתר לחץ דם, מצביעים על הפגם הטמון מסלול איתות רכב בבעלי חיים דאל, וזה הרבה יותר חמור DS.
השיטה יעילה בקביעת vivo לשעבר תגובתיות כלי הדם בעורקים התנגדות mesenteric דומים כלי דם קטנים השוואות בין אגוניסטים שונים ו / או היריבים ניתן בקלות באופן עקבי העריכו Side-by-הצד 6,7,8.
Protocol
Discussion
יתר לחץ דם הוא הגורם העיקרי לתחלואה קרדיווסקולרית, מוחין כליות / תמותה. המופע של יתר לחץ דם גבוה באוכלוסייה ומלח רגיש יתר לחץ דם גבוה במיוחד בקרב האוכלוסייה ההזדקנות, שכיחה יותר שחורים מאשר לבנים. זהו ככל הנראה בשל הנטייה של שחורים לשמור נתרן הכליות שלהם 9. מלח רג…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
הפרויקט מתואר נתמכה על ידי מספרים פרס HL064761 R01, R25 HL059868, 1SC1 HL099139 ו P20 MD000175 טופס המכונים הלאומיים לבריאות. התוכן הוא באחריות הבלעדית של הכותבים ולא בהכרח מייצגים את הדעות הרשמיות של מכוני הבריאות הלאומיים.
Materials
| Name of equipment/ reagent | Company | Catalogue number | Comments(optional) |
|---|---|---|---|
| Auto Dual Wire Myograph System-510A DMT-USA, Inc. | Atlanta, GA. | 100151 | |
| PowerLab/4SP Data Acquisition System | ADInstruments, Colorado Springs, CO. | ML750 | New models with 4-16 input channels are available. |
| Dell Dimension XPS Gen 4 Computer | Dell | ||
| Stemi SV II (Apo) Dissection Microscope with Ocular | Carl Zeiss International. | ||
| Wistar, Dahl salt-sensitive, Dahl salt-resistant rats | Harlan Sprague Dawley, Indianapolis, IN. | ||
| Rodent chow | Harland Tekland, Madison, WI. | ||
| Phenylephrine | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO. | ||
| Other chemicals | All chemicals used were of the purest grades available commercially. |
Riferimenti
- Mulvany, M. J., Halpern, W. Mechanical properties of vascular smooth muscle cells in situ. Nature. 260, 617-619 (1976).
- Bevan, J. A., Osher, J. V. A direct method for recording tension changes in the wall of small blood vessels in vitro. Agents Actions. 2, 257-260 (1972).
- Mulvany, M. J. Procedures for investigating of small vessels using small vessel myograph. DMT Danish Myo Technology. , (2004).
- Angus, J. A., Wright, C. E. Techniques to study the pharmacodynamics of isolated large and small blood vessels. J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 44, 395-407 (2000).
- Halpern, W., Mulvany, M. J., Warshaw, D. M. Mechanical properties of smooth muscle cells in the walls of arterial resistance vessels. J. Physiol. 275, 85-101 (1978).
- Lindhorst, J., Alexander, N., Blignaut, J., Rayner, B. Differences in hypertension between blacks and whites: an overview. Cardiovasc. J. Afr. 18, 241-247 (2007).
- Eley, S. L., Allen, C. M., Williams, C. L., Bukosi, R. D., Pointer, M. A. Action of thiazide on renal interstitial calcium. Am. J. Hypertens. 21, 814-819 (2008).
- Palmer, C. E., Rudd, M. A., Bujoski, R. D. Renal interstitial Ca2+ during sodium loading of normotensive and Dal-salt hypertensive rats. Am. J. Hypertens. 16, 771-776 (2003).
- Hurwitz, S. Homeostatic control of plasma calcium concentration. Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. 31, 41-100 (1996).
- Brown, E. M., MacLeod, R. J. Extracellular sensing and extracellular calcium signaling. Physiol. Rev. 81, 239-297 (2001).
- Breitwieser, G. E. Extracellular calcium as an integrator of tissue function. Int. J. Biochem. Cell Biol. 40, 1467-1480 (2008).
- Mupanomunda, M. M., Wang, Y., Bukoski, R. D. Effect of chronic sensory denervation on Ca2+-induced relaxation of isolated mesenteric resistance arteries. Am. J. Physiol. 274, 1655-1661 (1998).
- Mupanomunda, M. M., Ishioka, N., Bukoski, R. D. Interstitial Ca2+ undergoes dynamic changes sufficient to stimulate nerve-dependent Ca2+-induced relaxation. Am. J. Physiol. 276, 1035-1042 (1999).
- Mupanomunda, M. M., Tian, B., Ishioka, N., Bukoski, R. D. Renal interstitial Ca2+. Am. J. Physiol. Renal Physiol. 278, F644-F649 (2000).
- Awumey, E. M., Hill, S. K., Diz, D. I., Bukoski, R. D. Cytochrome P-450 metabolites of 2-arachidonoylglycerol play a role in Ca2+-induced relaxation of rat mesenteric arteries. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 294, 2363-2370 (2008).
- Chen, W., Bergsman, J. B., Wang, X., Gilkey, G., Pierpoint, C. R., Daniel, E. A., Awumey, E. M., Dauban, P., Dodd, R. H., Ruat, M., Smith, S. M. Presynaptic external calcium signaling involves the calcium-sensing receptor in neocortical nerve terminals. PloS One. 5, e8563-e8563 (2010).
- Bukoski, R. D. The perivascular sensory nerve Ca2+ receptor and blood pressure regulation: a hypothesis. Am. J. Hypertens. 11, 1117-1123 (1998).
- Bukoski, R. D. Dietary Ca2+ and blood pressure: evidence that Ca2+-sensing receptor activated sensory nerve dilator activity couples changes in interstitial Ca2+ with vascular. 16, 218-221 (2001).
