망막 섹션 Morphometric 분석
Summary
이 비디오는 망막 신경절 세포의 개수 (RGCs)를 quantifying하고 RGCs의 크기를 측정, 내부 핵 층의 두께를 측정 포함 망막의 morphometric 분석의 세 가지 유형을 보여줍니다. 기술 morphometric 분석을위한 간단하면서도 과학적인 플랫폼을 제공할 수 있습니다.
Abstract
망막 섹션 Morphometric 분석은 망막 질환 검사에 사용되었습니다. 예제의 경우의 연결 세포는 크게 N-메틸-D-aspartate와 쥐 모델에서 망막 신경절 세포 계층 (RGCL)에 분실되었다 (NMDA) excitotoxicity 1, 망막 국소 빈혈 – reperfusion 상해 2, 녹내장 3-유도된. INL 및 내부 plexiform 계층의 감소 (IPL)은 카인산-매개 글루 탐 산염의 excitotoxicity 4로 들어서는 쥐 '눈에는 citicoline 치료 반대했다 두께. RGC 밀도와 소마 크기의 변경은 고가 intraocular 압력 3,5,6과 눈속에서 다른 약물 치료와 함께 관찰되었다. 따라서 망막 morphometries를 분석의 객관적인 방법을 갖는 것은 망막 pathologies 및 치료 전략의 효과를 평가에 큰 의미있을 것으로 생각됩니다.
망막 구조는 멀티 레이어와 뉴런 exi 여러 종류입니다망막에있는 일. 이러한 서로 다른 레이어의 휴대폰 번호, 휴대 크기 및 두께 등 망막의 morphometric 매개 변수는 세포 배양 시스템보다 더 복잡합니다. 초기에 이러한 매개 변수는 다른 상용 이미징 소프트웨어를 사용하여 감지가 가능하다. 값은 상대적인 가치를 일반적이며, 정확한 값으로 변경하면 더 정확한 계산을 할 수 있습니다. 또한, 세포의 크기와 형태의 추적은 특히 만성 녹내장 모델에서 정확하고 통계 분석을위한 충분한 예민하지 않을 수 있습니다. 이 프로토콜에 사용되는 측정은보다 정확하고 편리한 방법을 제공했습니다. 그리고 세포의 라인 및 크기의 절대 길이를 직접 및 기타 파일을 복사할 쉽게 신고 할 수 있습니다. 예를 들어, INL의 안쪽과 바깥쪽 가장 핵의 마진을 추적하고 두께를 측정하는 90도 각도를 그리는 소프트웨어를 사용하여 라인을 형성했다. 소프트웨어의 도움없이는 아마도 경사 라인과 망막 두께의 변화가 있지만개별 관측 사이에서 반복하지. 또한, RGCs의 개수 및 밀도도 계량하실 수 있습니다. 이 프로토콜은 성공적으로 망막의 기능을 quantitating에 다양성을 감소 최소한의 변화를 감지에서 감도를 증가시킵니다.
이 비디오는 망막 섹션 morphometric 분석의 세 가지 유형을 설명합니다. 그들은 INL 두께를 측정 RGCs의 수를 quantifying와 절대값에 RGCs의 크기를 측정 등이 있습니다. 이 세 가지 분석은 스테레오 탐정 (- MicroBrightField 주식 MBF Bioscience)와 함께 진행됩니다. 기술 morphometric 분석을위한 간단하면서도 과학적인 플랫폼을 제공할 수 있습니다.
Protocol
Discussion
1. 보다 정확한 두께 측정을 구하는 방법?
이 버튼을 "확대"를 클릭하여 이미지를 확대 및 추적 창에서 클릭두고 있습니다. INL 테두리가 분명하게 볼 수 있습니다. 라인의 끝은 INL의 바깥 경계에 있지 않으면, 우리는 편집 모드에서 라인을 조정할 수 있습니다. 관련 라인을 따기 후 오른쪽 추적 창을 클릭하고 선택 "선택된 윤곽선의 포인트를 넣습니다." 추가 포인?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 실험실의 안과 연구 작업은 미국의 건강 보조 재단, 진달래 (1972) 기증 기금, 그리고 HKU 소형 프로젝트 기금 (20,097,176,185)에 의해 지원됩니다.
Materials
| Name of the reagent | Tipo | Company | Catalogue number |
| Stereo Investigator | MBF Bioscience Analysis Software | MicroBright Field | |
| Microscope | Olympus BX51 | Olympus Corporation | BX51 |
Riferimenti
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