Los análisis morfométricos de las Secciones de retina
Summary
Este video muestra tres tipos de análisis morfométricos de la retina, que incluyen la medición del espesor de la capa interna nuclear, cuantificar el número de células ganglionares de la retina (CGR) y la medición de los tamaños de las CGR. La técnica puede ofrecer una plataforma sencilla pero científica de análisis morfométricos.
Abstract
El análisis morfométrico de secciones de retina se han utilizado en el examen de enfermedades de la retina. Por ejemplos, las células neuronales se perdieron significativamente en la capa de células ganglionares de retina (RGCL) en modelos de ratas con N-metil-D-aspartato (NMDA)-inducido excitotoxicidad 1, la retina isquemia-reperfusión 2 y 3 del glaucoma. Reducción de la capa plexiforme INL e interior (IPL) de espesor se revirtieron con el tratamiento con citicolina en los ojos de las ratas sometidas a la excitotoxicidad del glutamato kaínico mediada por el ácido 4. La alteración de la densidad de CGR y los tamaños de soma se observaron con los tratamientos farmacológicos diferentes en los ojos con presión intraocular elevada 3,5,6. Por lo tanto, con métodos objetivos de análisis de los morfometría retinianos pueden ser de gran importancia en la evaluación de patologías de la retina y la eficacia de las estrategias terapéuticas.
La estructura de la retina es multi-capas y diferentes tipos de neuronas exiº en la retina. Los parámetros morfométricos de la retina, tales como el número de células, tamaño de la celda y el espesor de las capas diferentes son más complejos que el sistema de cultivo celular. Al principio, estos parámetros pueden ser detectados utilizando otro software de imagen comercial. Los valores son normalmente de valor relativo, y cambiando el valor exacto puede ser necesario el cálculo más exacto. Además, el trazado del tamaño celular y la morfología no puede ser precisa y suficientemente sensible como para el análisis estadístico, especialmente en el modelo de glaucoma crónico. Las medidas utilizadas en este protocolo siempre de una manera más precisa y fácil. Y la longitud absoluta de la línea y el tamaño de la celda se puede informar directamente y fácil de ser copiado en otros archivos. Por ejemplo, se trazó el margen de los núcleos más interior y exterior en el INL y formó una línea a continuación, utilizando el software para dibujar un ángulo de 90 grados para medir el espesor. Aunque sin la ayuda del software, la línea oblicua tal y el cambio de espesor de la retina puedeno ser repetible entre los observadores individuales. Además, el número y la densidad de CGR también puede ser cuantificado. Este protocolo con éxito disminuye la variabilidad en la cuantificación de las características de la retina, aumenta la sensibilidad en la detección de cambios mínimos.
Este vídeo se muestran tres tipos de análisis morfométricos de las secciones de la retina. Estas incluyen la medición del espesor de la INL, que cuantifica el número de las células y medir el tamaño de las CGR en valor absoluto. Estos tres análisis se llevan a cabo con el investigador estéreo (MBF Bioscience – MicroBrightField, Inc.). La técnica puede ofrecer una plataforma sencilla pero científica de análisis morfométricos.
Protocol
Discussion
1. Cómo obtener una medición de espesores más precisa?
Puede ampliar la imagen haciendo clic en "Zoom" y la izquierda haga clic en la ventana de seguimiento. El borde INL puede verse claramente. Si la punta de la línea no está en la frontera exterior de la INL, podemos ajustar la línea en el modo de edición. Después de recoger la línea en cuestión, haga clic derecho en la ventana de la búsqueda y elegir la opción "Punto de inserción en el contorno seleccionado"….
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
El trabajo en la investigación del ojo en este laboratorio con el apoyo de la Fundación Panamericana de la Salud Auxiliar, Azalea (1972) Fondo de Dotación y el Fondo de Pequeños Proyectos HKU (20097176185).
Materials
| Name of the reagent | Tipo | Company | Catalogue number |
| Stereo Investigator | MBF Bioscience Analysis Software | MicroBright Field | |
| Microscope | Olympus BX51 | Olympus Corporation | BX51 |
Riferimenti
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