Summary

Siyatik Sinir Sıçanlarda Ağrı aşırı duyarlılık Test Kronik daraltma

Published: March 13, 2012
doi:

Summary

Cerrahi basitlik ve sağlam davranışsal sonuçları nedeniyle, siyatik sinirin kronik daralma nöropatik ağrı seçkin hayvan modelleri biridir. Ameliyat sonrası 24 saat içinde, ağrı aşırı duyarlılık kurulan ve kantitatif bir von Frey aesthesiometer (mekanik test) ve plantar analjezi metre (termal testi) kullanılarak ölçülebilir.

Abstract

Kronik nöropatik ağrı, merkezi ya da periferal sinir sisteminin hasar görmesi sonucu, nüfusun 1,2% 7-18 etkileyen, yaygın bir ve zayıflatıcı bir durumdur. Belirtileri spontan (gibi karıncalanma, yanma, elektrik çarpması) ağrı, disestezi, parestezi, allodini (ağrı normal olmayan ağrılı uyaranlar kaynaklanan) ve hiperaljezi (ağrılı uyaranlara artmış yanıt) içerir. Duysal semptomlar uykusuzluk ve depresyon gibi davranışsal özürlü ile komorbid bulunmaktadır. Kronik nöropatik ağrı çalışmak için periferik sinir yaralanması taklit eden birçok hayvan modellerinde geliştirilmiş olup, en yaygın olarak kullanılan bir Bennett ve Xie (1988) tek taraflı siyatik sinir kronik daralma yaralanma (CCI) 3 (Şekil 1). Burada CC ve test ağrısı aşırı duyarlılık gerçekleştirmek için bir yöntem sunulmaktadır.

CCİ olarak yaparak maruz kalan bir tarafta siyatik sinir ile, anestezi altında yapılırkin insizyon ve gluteus süperfisiyalis ve biseps femoris kaslar arasındaki bağ dokusu ile kesme. Dört kromik katgüt Ligatürleri sadece kapamak için, 1 mm aralıklarla siyatik sinir etrafındaki gevşek bağlanmış ama epinöral kan akışını tutuklama değildir. Yara deri kas ve mahsullerindeki dikişler ile kapatılır. Hayvan daha sonra ağrı aşırı duyarlılık testleri başlamadan önce 24 saat için ameliyatın izin verilir.

Davranış testi için, sıçanlarda test cihazları yerleştirilir ve test prosedürü alışmakta izin verilir. Test alanı siyatik sinir dağılımında içinde düşer sıçanın sol arka ayağını orta plantar (Şekil 2) 'dir. Mekanik çekme eşiği mekanik elektronik bir dinamik taban von Frey aesthesiometer veya manuel von Frey kıllar 4 kullanarak yaralı ve yaralanmamış hindpaws hem de uyararak değerlendirilir. Mekanik bir geri çekme eşiği uygulanan yüksek basınç(Gram cinsinden) pençe çekme tetikler. İlk Hargreaves ve ark (1988) tarafından açıklanan ısıl çekmede gecikme, ölçülmesi için, sıçanın sol arka ayağını bir plantar analjezi metre 5,6 kullanarak şeffaf bir cam yüzeyi sayesinde mükemmel bir ısı ışınına maruz kalmaktadır. Isı uyarana çekilme gecikme yaralı ve yaralanmamış hindpaws hem pençe çekme için zaman olarak kaydedilir. Aşağıdaki CC, yaralı pençede mekanik çekme eşiği, hem de ısı geri çekme gecikmesi bazal ölçümler ve elin pençe (Şekil 3) ile karşılaştırıldığında, gerek önemli ölçüde azalır. Ağrı duyarlılık testi ile birlikte periferik sinir hasarı CCİ modeli kronik nöropatik ağrı değiştirmek için potansiyel terapötik ajanların etkinliğini araştırmak için bir model sistemi sağlar. Laboratuarımızda, biz patogenezinde nöro-immün etkileşimlerin rolünü araştırmak için hindpaws termal ve mekanik hassasiyet yanında CCİ kullanmaknöropatik ağrı ve tedavisi.

Protocol

1. Siyatik Sinir Kronik daraltma Aseptik teknikler cerrahi işlem için kullanılmalıdır. % 70 etanol ile cerrahi iş yüzeyi dezenfekte edin ve otoklavlayarak önceden steril aletler (örn., ince makas, forseps ve retraktör), tüller, zımba ve bezlerden de hazırlar. Çoklu operasyonlar için, temiz ve% 70 etanol ya da sıçanlar arasında kuru bir boncuk sterilizanlar ile resterilise aletleri. Bir cerrahi maske, saç kaporta ve steril eldiven giyilmelidir. Si…

Discussion

CCİ kronik nöropatik ağrı yaygın olarak kullanılan periferik sinir yaralanması modelidir. Bunu gerçekleştirmek için oldukça basit ve yaralanma sonrası en az bir ay için sağlam ve kararlı bir ağrı aşırı duyarlılık üretir. CCİ takiben sıçan yaralı sıçanın sol arka ayağını (parmakları bir arada tutan ve plantar fleksiyon ve pençe everte) yanı sıra, sallayarak koruma ve spontan ağrı 9 varlığını düşündüren yaralı sıçanın sol arka ayağını yalamaya tekrarlanan an…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Yazarlar Bennett ve Xie (1988) tarafından CCİ modelin orijinal tanımı kabul etmek istiyorum.

Bu çalışma Bilim ve GMT Tıbbi Araştırma Ulusal Sağlık ve Avustralya Tıbbi Araştırma Konseyi (ID # 568637) ve NSW hibe tarafından kısmen desteklenmiştir.

Materials

Name of the reagent/equipment Company Catalogue number Comments
Chromic gut Ethicon G-211 4-0 thickness
Isoflurane Delvet Pty. Ltd., Seven Hills, NSW n/a  
Mersilk Ethicon W-580 5-0 thickness
Autoclip Becton Dickinson 427631 9 mm stainless steel
Riodine Orion R1000802F 1% w/v iodine
Thermal plantar analgesia instrument Ugo Basile 37370  
Dynamic plantar aesthesiometer Ugo Basile 37400  

Riferimenti

  1. Bouhassira, D., Lanteri-Minet, M., Attal, N., Laurent, B., Touboul, C. Prevalence of chronic pain with neuropathic characteristics in the general population. Pain. 136, 380-387 (2008).
  2. Toth, C., Lander, J., Wiebe, S. The prevalence and impact of chronic pain with neuropathic pain symptoms in the general population. Pain Med. 10, 918-929 (2009).
  3. Bennett, G. J., Xie, Y. K. A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 33, 87-107 (1988).
  4. Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. J. Neurosci. Methods. 53, 55-63 (1994).
  5. Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32, 77-88 (1988).
  6. Yeomans, D. C., Proudfit, H. K. Characterization of the foot withdrawal response to noxious radiant heat in the rat. Pain. 59, 85-94 (1994).
  7. Dougherty, P. M., Garrison, C. J., Carlton, S. M. Differential influence of local anesthetic upon two models of experimentally induced peripheral mononeuropathy in the rat. Brain Research. 570, 109-115 (1992).
  8. Bennett, G. J., Chung, J. M., Honore, M., Seltzer, Z. Models of neuropathic pain in the rat. Curr. Protoc. Neurosci. Chapter 9, (2003).
  9. Attal, N., Jazat, F., Kayser, V., Guilbaud, G. Further evidence for 'pain-related' behaviours in a model of unilateral peripheral mononeuropathy. Pain. 41, 235-251 (1990).
  10. Hu, B., Doods, H., Treede, R. -. D., Ceci, A. Depression-like behaviour in rats with mononeuropathy is reduced by the CB2-selective agonist GW405833. Pain. 143, 206-212 (2009).
  11. Jesse, C., Wilhelm, E., Nogueira, C. Depression-like behavior and mechanical allodynia are reduced by bis selenide treatment in mice with chronic constriction injury: a comparison with fluoxetine, amitriptyline, and bupropion. Psychopharmacology. 212, 513-522 (2010).
  12. Monassi, C. R., Bandler, R., Keay, K. A. A subpopulation of rats show social and sleep-waking changes typical of chronic neuropathic pain following peripheral nerve injury. Eur. J. Neurosci. 17, 1907-1920 (2003).
  13. Roeska, K., Doods, H., Arndt, K., Treede, R. D., Ceci, A. Anxiety-like behaviour in rats with mononeuropathy is reduced by the analgesic drugs morphine and gabapentin. Pain. 139, 349-357 (2008).
  14. Kontinen, V. K., Kauppila, T., Paananen, S., Pertovaara, A., Kalso, E. Behavioural measures of depression and anxiety in rats with spinal nerve ligation-induced neuropathy. Pain. 80, 341-346 (1999).
  15. Urban, R., Scherrer, G., Goulding, E. H., Tecott, L. H., Basbaum, A. I. Behavioral indices of ongoing pain are largely unchanged in male mice with tissue or nerve injury-induced mechanical hypersensitivity. Pain. 152, 990-1000 (2011).
  16. Myers, R. R., Yamamoto, T., Yaksh, T. L., Powell, H. C. The role of focal nerve ischemia and Wallerian degeneration in peripheral nerve injury producing hyperesthesia. Anesthesiology. 78, 308-316 (1993).
  17. Grace, P. M., Hutchinson, M. R., Manavis, J., Somogyi, A. A., Rolan, P. E. A novel animal model of graded neuropathic pain: utility to investigate mechanisms of population heterogeneity. J. Neurosci. Methods. 193, 47-53 (2010).
  18. Kajander, K. C., Pollock, C. H., Berg, H. Evaluation of hindpaw position in rats during chronic constriction injury (CCI) produced with different suture materials. Somatosens Mot. Res. 13, 95-101 (1996).
  19. Xu, J., Pollock, C. H., Kajander, K. C. Chromic gut suture reduces calcitonin-gene-related peptide and substance P levels in the spinal cord following chronic constriction injury in the rat. Pain. 64, 503-509 (1996).
  20. Sommer, C., Schafers, M. Painful mononeuropathy in C57BL/Wld mice with delayed wallerian degeneration: differential effects of cytokine production and nerve regeneration on thermal and mechanical hypersensitivity. Brain. Res. 784, 154-162 (1998).
  21. Walczak, J. S., Beaulieu, P. Comparison of three models of neuropathic pain in mice using a new method to assess cold allodynia: the double plate technique. Neurosci. Lett. 399, 240-244 (2006).
  22. Maves, T. J., Pechman, P. S., Gebhart, G. F., Meller, S. T. Possible chemical contribution from chromic gut sutures produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 54, 57-69 (1993).
  23. Tall, J. M., Stuesse, S. L., Cruce, W. L., Crisp, T. Gender and the behavioral manifestations of neuropathic pain. Pharmacol Biochem. Behav. 68, 99-104 (2001).
  24. Chung, J. M., Choi, Y., Yoon, Y. W., Na, H. S. Effects of age on behavioral signs of neuropathic pain in an experimental rat model. Neurosci. Lett. 183, 54-57 (1995).
  25. Tanck, E. N., Kroin, J. S., McCarthy, R. J., Penn, R. D., Ivankovich, A. D. Effects of age and size on development of allodynia in a chronic pain model produced by sciatic nerve ligation in rats. Pain. 51, 313-316 (1992).
  26. Shir, Y., Sheth, R., Campbell, J. N., Raja, S. N., Seltzer, Z. Soy-containing diet suppresses chronic neuropathic sensory disorders in rats. Anesth. Analg. 92, 1029-1034 (2001).
  27. Yoon, Y. W., Lee, D. H., Lee, B. H., Chung, K., Chung, J. M. Different strains and substrains of rats show different levels of neuropathic pain behaviors. Experimental Brain Research. 129, 167-171 (1999).
  28. Mogil, J. S., Davis, K. D., Derbyshire, S. W. The necessity of animal models in pain research. Pain. 151, 12-17 (2010).
  29. Mogil, J. S. Animal models of pain: progress and challenges. Nat. Rev. Neurosci. 10, 283-294 (2009).
  30. Langford, D. J. Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse. Nat. Methods. 7, 447-449 (2010).
  31. Austin, P. J., Moalem-Taylor, G. The neuro-immune balance in neuropathic pain: involvement of inflammatory immune cells, immune-like glial cells and cytokines. J. Neuroimmunol. 229, 26-50 (2010).
check_url/it/3393?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Austin, P. J., Wu, A., Moalem-Taylor, G. Chronic Constriction of the Sciatic Nerve and Pain Hypersensitivity Testing in Rats. J. Vis. Exp. (61), e3393, doi:10.3791/3393 (2012).

View Video