子宮組織の自動移植による外科的に誘発される子宮内膜症のマウスモデル
Summary
腸間膜動脈カスケードに子宮組織の自動移植によるマウスおよびラットにおける子宮内膜症の外科的誘導の説明。
Abstract
子宮内膜症は、その病因は不明のまま慢性、痛みを伴う病気です。さらに、子宮内膜症の治療は、腹腔鏡病変の除去、および/または痛みや不妊の症状の慢性的な医薬品管理を必要とすることができます。子宮内膜症に関連するコストは、米国で1年間あたり22億ドルと推定されている。この謎めいた病気の根底にあるメカニズムの理解を促進するために、動物モデルが採用されている。霊長類では、自発的に子宮内膜症を開発するため、霊長類モデルに最も近い女性の病気に似ています。齧歯類のモデルは、しかし、よりコスト効果と2すぐに利用できます。我々はここに記述するモデルは、腸の腸間膜（図1）への子宮組織の自家移転を伴いますし、最初のラット3で開発され、後でマウス4に転送されました。外科的に誘発された子宮内膜症の自家齧歯類モデルの目的は、模倣することです。女性の病気。我々と他の人は以前にマウスやラットの疾患5,6と女性で観察されたミラーをから子宮内膜症の病変で観察される遺伝子発現のパターンが示されている。マウスで手術を行うことの利点の一つは、利用可能なトランスジェニックマウス系統の豊富な子宮内膜症の確立と成長に重要な特定のコンポーネントの役割を決定する上で研究者を助けることができるということです。摘出したヒト子宮内膜断片は、免疫不全マウスの腹膜に導入されている別のモデルにも広く使用されていますが、子宮内膜症2,7に重要であると考えられている正常な免疫システムの不足によって制限されます。重要なのは、外科的に誘発される子宮内膜症のマウスモデルでは、免疫系8、ホルモン9,10および環境要因11,12が FERTで子宮内膜症だけでなく、子宮内膜症の影響をどのように影響するか研究するために使用されている汎用性の高いモデルです。ility 13と痛み14。
Protocol
1。ライブ動物手術のための計画適切な承認が実験動物で動作するように受信されたことを確認してください。 オーダーマウスとその新しい環境に順化の少なくとも一週間を許可する。 男性フェロモンへの曝露がない状態で収容された雌マウスは、サイクリング、ウィッテン効果15,16と呼ばれる現象を停止することができます。 5日ごとにメスのケージに転送尿?…
Discussion
マウスの子宮内膜症の外科的誘導を実行中に注意すべきいくつかの重要なパラメータがあります。最初に、子宮内膜症はエストロゲン依存性疾患であり、そのようなこの手術としてインタクトな動物で、あるいはエストロゲン20で補足した卵巣摘出動物で実行する必要があります。第二に、動脈カスケードに子宮内膜生検を縫合は、細心の注意を払って行う必要があります。我々…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
最適化で、その支援のためのこの原稿の批判的検討のためのクリスKassotisとオードリーベイリーへと博士スコットKorte、ジョセフBeeman、アリソンCurfman、ポールキンボール、ブリジットNeibreggue、ヤコブレーデル、エイミーシュローダー、マイヤスタインバーグ、とステイシーWinkelerに感謝我々の研究室では、このモデルの。資金は、臨床Biodetectivesトレーニンググラント（NIH T90）（KEP）、ミズーリ州のライフサイエンスの大学や研究機会プログラム、MU研究評議会、MU研究会助成金およびNIH R21HD056441（SCN）によって提供されていました。
Materials
| Name of the reagent/equipment | Company | Catalogue number |
| Wax pencil | Fisher | NC9954135 |
| Glass slide | Fisher | 12-550-433 |
| Eyedropper | Fisher | S79383 |
| Standard light microscope for evaluating vaginal cytology smears | ||
| Buprenorphine HCL c3 (CARJET) 10X1ml | Butler Animal Health Supply | 022891 |
| Sterile phosphate buffered saline (PBS) | Gibco | 14040-117 |
| 10,000U/ml Penicillin, 10,000μg/ml Streptomycin in 0.85% NaCl | Hyclone | SV30010 |
| Isoflurane | Abbott Animal Health | 05260-05 |
| Isoflurane non-rebreathing anesthetic system | ||
| Recirculating hot water heating pad | ||
| 30 ml syringe sheath | Fisher | 14-823-16G |
| Powder free sterile gloves | Fisherbrand | 19020558 |
| Ophthalmic ointment | Major Pharmaceuticals | 10033691 |
| Small electrical clippers | Wahl | 9861-600 |
| Chlorhexidine scrub | Fisher | NC9863042 |
| 70% Ethanol | ||
| Polylined sterile field | Busse Hospital Disposables | 696 |
| Size 3 scalpel | Fisher | 22-079-657 |
| Number 10 scalpel blades | Fisher | 22-079-681 |
| Small surgical scissors | Roboz | RS-5850 |
| Small serrated semi-curved forceps | Roboz | RS-5135 |
| 5-0 black braided silk suture | Ethicon | K870H |
| Sterilized pyrex glass Petri dishes | Corning | 70160-101 |
| 2 mm biopsy punch | Miltex | 33-31 |
| Sterile gauze | Kendall | 1806 |
| 6-0 black monofilament ethilon nylon suture | Ethicon | 697G |
| Needle drivers (optional) | World Precision Instruments | 500023 |
| 5-0 undyed braided coated vicryl suture | Ethicon | J490G |
| 9mm Autoclip wound clips | Becton Dickinson | 427631 |
| Autoclip applier & remover | Becton Dickinson | 427630 |
| 23G needle | Becton Dickinson | 305193 |
| 1cc syringe | Becton Dickson | 301025 |
| 5X magnifying glass stand (optional) | Fisher | 14-648-23 |
| 10% Buffered formalin | Fisher | SF100-4 |
| Calipers | Roboz | RS-6466 |
| Processing/embedding cassettes | Fisher | 15-197-700A |
| Biopsy foam pads | Fisher | 22-038-222 |
| RNAqueous RNA isolation kit | Ambion | AM1912 |
| Liquid nitrogen | ||
| Snap cap microcentrifuge flat top tube | Fisher | 02-681-240 |
| Ketamine (optional) | Simga | K4138 |
| Domitor (medetomidine hydrochloride) (optional) | Tocris | 2023 |
| Antisedan (atipamezole) (optional) | Sigma | A9611 |
Riferimenti
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Citazione di questo articolo
Pelch, K. E., Sharpe-Timms, K. L., Nagel, S. C. Mouse Model of Surgically-induced Endometriosis by Auto-transplantation of Uterine Tissue. J. Vis. Exp. (59), e3396, doi:10.3791/3396 (2012).