שילוב הקרנות של מודל העכבר Orthotopic המוח גידול
Summary
מטרת מאמר זה היא לתאר את השימוש במודל גליובלסטומה orthotopic ללימודי chemoradiation. מאמר זה יהיה ללכת על פי עיבוד בתא, השתלה, והקרנות של העכבר באמצעות המודל תוך גולגולתי.
Abstract
Multiforme גליובלסטומה (GBM) הם הנפוצים ביותר גידולים אגרסיביים בוגרים במוח העיקרי 1. בשנים האחרונות חלה התקדמות משמעותית בהבנת המכניקה של הפלישה הגידול, חיסון intracerebral ישירה של הגידול מספק הזדמנות להתבונן בתהליך פולשני בסביבה מתאימה מבחינה פיזיולוגית 2. עד כמה גידולים במוח האדם מודאגים, המודלים orthotopic זמין כרגע מבוססים או על ידי הזרקת תאים stereotaxic של המתלים או ההשתלה של פיסת מוצק של הגידול בהליך craniotomy מסובך 3. בטכניקה שלנו אנחנו קוצרים תאים בתרבית רקמה ליצירת ההשעיה תא נהג להשתיל ישירות לתוך המוח. משך הניתוח הוא כ 30 דקות, כמו עכבר שצריך להיות במטוס כירורגית מתמיד, זריקות הרדמה משמש. העכבר ממוקם לנענע stereotaxic על ידי Stoetling (איור 1). בירכתי הספינהאה באזור הניתוח הוא ניקה והכין, מבצעים חתך, ועל גבחת נמצא כדי לקבוע את המיקום של craniotomy. מיקום craniotomy הוא 2 מ"מ ימינה, 1 מ"מ מקורי כדי גבחת. העומק הוא 3 מ"מ מפני השטח של הגולגולת, ותאי מוזרקים בשיעור של μl 2 כל 2 דקות. העור מאוחה על ידי תפירה עם 5-0 PDS, והעכבר מותר להעיר על כרית חימום. מניסיוננו, בהתאם לקו הסלולרי, הטיפול יכול להתבצע בין 7-10 ימים לאחר הניתוח. משלוח סמים תלויה בהרכב התרופה. לטיפול בקרינה העכברים מורדמים, והכניסו מותאם אישית עשה לנענע. עופרת מכסה את גופו של העכבר חושף רק את המוח של העכבר. המחקר של tumorigenesis ואת ההערכה של טיפולים חדשים עבור GBM דורשים מדויקות לשחזור גידול במוח במודלים של בעלי חיים. לכן אנו משתמשים במודל המוח orthotopic ללמוד את האינטראקציה של microenvironment של המוח הגידול, על מנת לבחון את effectivenESS של סוכני טיפוליות שונות עם וללא קרינה.
Protocol
Discussion
גליומות ממאירות, כגון multiforme glioblastoma, לייצג את הגידולים השכיחים ביותר במוח יסודי בעלי פרוגנוזה עגומה 4. ההישרדות של חולים שנפגעו GBM נשארה כמעט ללא שינוי בעשור האחרון (כלומר, 9-12 חודשים לאחר האבחון) למרות ההתקדמות ניתוח, הקרנות וכימותרפיה 5. התכונות של הדגם המת?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
מחקר זה נתמך על ידי מימון תוכנית המיפוי של NIH.
Materials
| Lab Standard Stereotaxic Instrutment | Stoelting Mouse and Rat Adaptor |
| Betadine | 100% EtOH |
| 70% EtOH | 50% Acetone |
| 6″ Q-tips | Alcohol swabs |
| Hamilton syringe 80008 | Ethicon 5-0 PD |
| 1701 SN 31-33G/1″/PT3 needle | 1 ml syringes |
| 25G needles | Heating pad |
| Artificial Tears Ointment | Very fine tipped permanent marker |
References
- Bleau, A. M., Holland, E. Trapping the mouse genome to hunt human alternations. Proc. Nat. Acad. Sci. U.S.A. 104, 7737-7738 (2007).
- McGrady, B. J., McCormick, D. A murine model of intracranial invasion: morphological observations on central nervous system invasion by melanoma cells. Clin. Exp. Metastasis. 10, 387-393 (1992).
- Fei, X., Zhang, Q., Dong, J., Diao, y., Wang, Z., Li, R., Wu, Z., Wang, A., Lan, Q., Zhang, S., Huang, Q. Development of clinically relevant orthotopic xenograft mouse model of metastatic lung cancer and glioblastoma through surgical tumor tissues injection with trocar. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. 29, 84-84 (2010).
- Fujita, M., Zhu, X., Sasaki, K., Ueda, R., Low, K., Pollack, I., Okada, H. Inhibition of STAT3 Promotes the Efficacy of Adoptive Transfer Therapy Using Type-1 CTLs by Modulation of the Immunological Microenvironment in a Murine Intracranial Glioma. J. Immunol. 180, 2089-2098 (2008).
- Candolfi, M., Curtin, J. F., Nichols, W. S., Muhammad, A. K. M. .. . G., King, G., Pluhar, G. D., McNiel, G. E., Ohlfest, E. A., Freese, J. R., Moore, P. F. Intracranial glioblastoma models in preclinical neuro-oncology: neuropathlogical characterization and tumor progression. J. Neurooncol. 85, 133-148 (2007).
- Kaye, A., Morstyn, G., Gardner, I., Pyke, K. Development of a xenograft glioma model in mouse brain. Cancer Research. 46, 1367-1373 (1986).
- Zhao, Y., Xiao, A., diPierro, C., Carpenter, J., Abdel-Fattah, R., Redpath, G., Lopez, M., Hussaini, I. An Extensive Invasive Intracranial Human Glioblastoma Xenograft Model. American Journal of Pathology. 176, 3032-3049 (2010).
- Learn, C., Grossi, P., Schmittling, R., Xie, W., Mitchell, D., Karikari, I., Wei, Z., Dressman, H., Sampson, J. Genetic Analysis of Intracranial Tumors in a Murine Model of Glioma Demonstrate a Shift in Gene Expression in Response to Host Immunity. J. Neuroimmunol. 182, 63-72 (2007).
- Martens, T., Laabs, Y., Günther, H., Kemming, D., Zhu, Z., Witte, L., Hagel, C., Westphal, M., Lamszus, K. Inhibition of Glioblastoma Growth in a Highly Invasive Nude Mouse Model Can Be Achieved by Targeting Epidermal Growth Factor Receptor but not Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2. Clin. Cancer Res. 14, 5447-5458 (2008).
- Purow, B., Schiff, D. Advances in the genetics of glioblastoma: are we reaching critical mass. Nat. Rev. Neurol. 5, 419-426 (2009).
