एक Orthotopic माउस ब्रेन ट्यूमर मॉडल में संयोजन रेडियोथेरेपी
Summary
इस अनुच्छेद के प्रयोजन लिए chemoradiation अध्ययन के लिए एक orthotopic glioblastoma के मॉडल के उपयोग का वर्णन है. यह आलेख हालांकि सेल प्रसंस्करण जाना, दाखिल होगा, और माउस एक intracranial मॉडल का उपयोग कर के रेडियोथेरेपी.
Abstract
Glioblastoma मल्टीफार्मी (जीबीएम) सबसे आम है और आक्रामक वयस्क प्राथमिक मस्तिष्क ट्यूमर 1. हाल के वर्षों में काफी प्रगति ट्यूमर आक्रमण की यांत्रिकी समझने में किया गया है, और ट्यूमर का प्रत्यक्ष intracerebral टीका physiologically उपयुक्त वातावरण में 2 इनवेसिव प्रक्रिया देख के अवसर प्रदान करता है. के रूप में दूर के रूप में मानव मस्तिष्क ट्यूमर का संबंध है, orthotopic वर्तमान में उपलब्ध मॉडल या तो एक जटिल कपाल – उच्छेदन प्रक्रिया के माध्यम से 3 सेल ट्यूमर का एक ठोस टुकड़ा के निलंबन या आरोपण के stereotaxic इंजेक्शन द्वारा स्थापित कर रहे हैं. हमारी तकनीक में हम टिशू कल्चर से कोशिकाओं की फसल के लिए एक सेल मस्तिष्क में सीधे प्रत्यारोपण के लिए इस्तेमाल किया निलंबन बनाने. सर्जरी की अवधि लगभग 30 मिनट है, और के रूप में माउस के लिए एक निरंतर शल्य विमान में की जरूरत है, एक इंजेक्शन संवेदनाहारी प्रयोग किया जाता है. माउस एक stereotaxic Stoetling (संख्या 1) द्वारा किए गए जिग में रखा गया है. पिछाड़ीएर शल्य चिकित्सा के क्षेत्र को साफ है और तैयार है, एक चीरा किया जाता है, और शीर्षस्थान कपाल – उच्छेदन के स्थान का निर्धारण करने के लिए स्थित है. कपाल – उच्छेदन के स्थान 2 सही मिमी और 1 मिमी शीर्षस्थान के लिए विजय – स्तम्भ है. खोपड़ी की सतह से 3 मिमी गहराई है, और कोशिकाओं μl 2 हर 2 मिनट की दर पर इंजेक्ट कर रहे हैं. त्वचा 5-0 पीडीएस के साथ sutured है, और माउस के लिए एक हीटिंग पैड पर जाग की अनुमति दी है. हमारे अनुभव से, सेल लाइन पर निर्भर करता है, इलाज सर्जरी के बाद 7-10 दिनों से जगह ले सकते हैं. दवा वितरण दवा संरचना पर निर्भर है. विकिरण उपचार के लिए चूहों anesthetized हैं, और एक जिग बनाया कस्टम में डाल दिया. लीड माउस शरीर को शामिल किया गया है और केवल माउस के मस्तिष्क को उजागर करता है. tumorigenesis के और जीबीएम लिए नए उपचारों के मूल्यांकन के अध्ययन सटीक और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य ब्रेन ट्यूमर पशु मॉडल की आवश्यकता है. इस प्रकार हम इस orthotopic मस्तिष्क मॉडल का उपयोग करने के लिए मस्तिष्क और ट्यूमर का microenvironment की बातचीत का अध्ययन, effectiven परीक्षणविभिन्न चिकित्सीय एजेंटों के साथ और विकिरण के बिना ईएसएस.
Protocol
Discussion
Glioblastoma मल्टीफार्मी के रूप में घातक gliomas, सबसे आम प्राथमिक मस्तिष्क ट्यूमर का प्रतिनिधित्व करते हैं और एक निराशाजनक पूर्वानुमान 4 है. जीबीएम से प्रभावित रोगियों की जीवन रक्षा पिछले दशक के दौरान लगभग अ?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस शोध NIH के अंदर का कार्यक्रम से धन के द्वारा समर्थित है.
Materials
| Lab Standard Stereotaxic Instrutment | Stoelting Mouse and Rat Adaptor |
| Betadine | 100% EtOH |
| 70% EtOH | 50% Acetone |
| 6″ Q-tips | Alcohol swabs |
| Hamilton syringe 80008 | Ethicon 5-0 PD |
| 1701 SN 31-33G/1″/PT3 needle | 1 ml syringes |
| 25G needles | Heating pad |
| Artificial Tears Ointment | Very fine tipped permanent marker |
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