Formålet med denne artikel er at beskrive brugen af en orthotopisk glioblastom model for chemoradiation undersøgelser. Denne artikel vil gå gennem celle behandling, implantering, samt strålebehandling af musen ved hjælp af en intrakraniel model.
Glioblastoma multiforme (GBM) er den mest almindelige og aggressive voksne primære hjernetumorer 1. I de senere år har der været betydelige fremskridt i forståelsen af mekanikken af tumor invasion, og direkte intracerebral podning af tumor giver mulighed for at observere den invasive proces i et fysiologisk egnet miljø 2. For så vidt angår humane hjernetumorer vedkommende er orthotopisk model i øjeblikket er tilgængelige enten ved stereotaktisk injektion af cellesuspensioner eller implantering af et massivt stykke tumor via en kompliceret kraniotomi procedure 3. I vores teknik vi høstes celler fra vævskultur for at skabe en cellesuspension, der anvendes til at implantere direkte ind i hjernen. Varigheden af operationen er cirka 30 minutter, og da musen skal være i en konstant kirurgisk plan, er en injicerbar anæstetikum. Musen anbringes i en stereotaktisk jig ved Stoetling (figur 1). Aftis det kirurgiske område renses og fremstilles, er et snit, og bregma er placeret til at bestemme placeringen af kraniotomi. Placeringen af kraniotomi er 2 mm til højre og 1 mm rostralt for bregma. Dybden er 3 mm fra overfladen af skallen, og cellerne injiceres ved en hastighed på 2 pi hvert 2. minut. Huden sutureres med 5-0 PDS, og musen bliver lov til at vågne op på en varmepude. Fra vores erfaring, afhængigt af den cellelinie kan behandlingen foregå fra 7-10 dage efter kirurgi. Afgivelsesenheden er afhængig af lægemiddelsammensætningen. For strålebehandling musene er bedøvet, og sat ind i en skræddersyet jig. Bly omfatter musens krop og udsætter kun hjernen på musen. Studiet af tumorigenese og evaluering af nye terapier for GBM kræver nøjagtige og reproducerbare hjernesvulst dyremodeller. Således har vi anvende denne orthotopisk hjerne model til at studere interaktionen af mikromiljøet af hjernen og tumoren, til at teste effectivenESS af forskellige terapeutiske midler med og uden stråling.
Maligne gliomer, såsom glioblastoma multiforme, repræsenterer de mest almindelige primære hjernetumorer og har en trist prognose 4. Overlevelse af patienter, der lider af GBM er forblevet stort set uændret i løbet af de sidste ti år (dvs. 9-12 måneder efter diagnose) på trods af fremskridt inden for kirurgi, strålebehandling og kemoterapi 5. Trækkene ved en passende model til undersøgelse af glioma behandling bør indeholde en reproducerbar placering af tumor og vækst af celler som et r…
The authors have nothing to disclose.
Denne forskning er støttet med midler fra Egne program NIH.
Lab Standard Stereotaxic Instrutment | Stoelting Mouse and Rat Adaptor |
Betadine | 100% EtOH |
70% EtOH | 50% Acetone |
6″ Q-tips | Alcohol swabs |
Hamilton syringe 80008 | Ethicon 5-0 PD |
1701 SN 31-33G/1″/PT3 needle | 1 ml syringes |
25G needles | Heating pad |
Artificial Tears Ointment | Very fine tipped permanent marker |