生长实验，以评估在酵母中的多聚谷氨酰胺毒性
Summary
这手稿描述了三个评估毒性的多聚谷氨酰胺（polyQ蛋白）扩张蛋白在酵母的补充协议<em>酿酒酵母</em>。这些协议可以很容易地进行修改，以监察在酵母中错误折叠的蛋白质的毒性。
Abstract
蛋白质错误折叠与人类的许多疾病，特别是神经退行性疾病，如阿尔茨海默氏症，帕金森氏病，亨廷顿氏病1。亨廷顿氏病（HD），是由异常扩张的多聚谷氨酰胺（polyQ蛋白）区域内的蛋白质亨廷顿。亨廷顿蛋白质的polyQ蛋白膨胀达到异常的构象（即它错误折叠），并导致细胞毒性2。至少有八个进一步的神经退行性疾病造成polyQ蛋白的扩展，包括脊髓小脑性共济失调和肯尼迪的疾病3。
模式生物酵母促进polyQ蛋白毒性的细胞和分子基础的重要见解，包括polyQ蛋白毒性内和分子间的因素的影响，并在细胞受损的细胞通路的识别表达polyQ蛋白膨胀蛋白质3-8。重要polyQ蛋白毒性在酵母中发现的许多方面，LY，复制在其他的实验系统，并一定程度上在血液透析病人的样本，从而表明polyQ蛋白毒性支撑的基本机制的发现酵母模型的意义。
直接和相对简单的方法来确定polyQ蛋白在酵母毒性是衡量表达polyQ蛋白膨胀蛋白质的酵母细胞的生长缺陷。这手稿描述了三种互补的实验方法，确定酵母测量表达polyQ蛋白膨胀蛋白质的酵母细胞的生长，polyQ蛋白毒性。前两个实验方法监测酵母的生长，对板的第三种方法监测液体酵母文化使用BioscreenC文书的增长。
此外，这个手稿描述实验处理酵母polyQ蛋白模型时可能出现的困难，并概述了战略，这将有助于避免或最大限度地减少这些困难。这里所描述的协议，可以用来识别和特征的遗传途径和调节polyQ蛋白毒性的小分子。此外，所述的检测可以作为模板在酵母模型由其他疾病相关的错误折叠的蛋白质引起的毒性的准确分析。
Protocol
Discussion
这手稿概述了三种互补的实验方法来衡量polyQ蛋白表达有毒polyQ蛋白膨胀蛋白的酵母细胞减少增长的基础上在模式生物酵母毒性。在酵母中的工作提供了深刻的见解成蛋白质错误折叠的基本细胞和分子机制及其随后的毒性，包括错误折叠和毒性polyQ蛋白膨胀蛋白9,11,12。在这里提出的协议为基础的实验已经帮助识别和描述polyQ蛋白毒性增强或抑制基因，polyQ蛋白毒性的小分子调节剂和细胞机制…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
衰老研究（远方），遗传性疾病基金会（高密度纤维板）和威廉·伍德基金会从美国联邦赠款支持在Duennwald实验室工作。
Materials
| Name of instrument | Company | Catalogue number |
| Frogger (6×8 pins) | V&P Scientific, San Diego | VP 407 AH |
| BioscreenC | Growthcurves USA | 5101370 |
| 100-well Honeycomb plates | Growthcurves USA | 9602550 |
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