Kronisk kateterisation af blodkar i rotten er ofte nødvendigt for administration af stoffer, få blodprøve i løbet af en periode eller for direkte bevidst blodtryksmålinger. Femoral arteriel kateterisation af rotten og tilsvarende målinger af blodtryk i den bevidste dyret vil blive demonstreret.
I flere studieretninger, adgang til kredsløbssygdomme i laboratorieforsøg er nødvendig. Farmakologiske studier i rotter med kronisk implanterede katetre tillade, at en forsker til effektivt og humant administrere stoffer, udførelse af gentagne blodprøver og assisterer i bevidst direkte målinger af blodtryk og hjertefrekvens. Når kateteret er implanteret langsigtet prøveudtagning er mulig. Åbenheden og kateter liv afhænger af flere faktorer, herunder låsen anvendte løsning, rødmen regime og kateter materiale. Denne video vil demonstrere metoden for femoral arterie og venøs kateterisation af rotten. Ud over videoen vil demonstrere brugen af femoralis venøse og arterielle katetre til blodprøvetagning, Drug Administration og brug af arteriekateter i at tage målinger af blodtryk og puls i en bevidst frit bevægelige rotter. En snor og sele fastgjort til en drejelig system vil gøre det muligt for dyret at være hobrugt og har prøver som forskeren med minimal forstyrrelse af dyret. For at fastholde åbenheden af kateteret, er omhyggelig daglig vedligeholdelse af kateteret ønsket ved hjælp låse løsning (100 E / ml hepariniseret saltvand), maskin-jorden stump spids sprøjte nåle og brugen af sprøjte-filtre for at minimere potentiel forurening. Med omhyggelig aseptisk kirurgiske teknikker, korrekt kateter materialer og omhyggelig kateter vedligeholdelse teknikker, er det muligt at opretholde patentet katetre og raske dyr i lange perioder ad gangen (flere uger).
Arteriel og venøs kateterisation har historisk været brugt til både akut og kronisk overvåger blodtryk, blodprøver og leverer stoffer i eksperimentelle rotte dyremodel 1-4. En stor fordel ved disse kirurgiske besætninger er, at det giver mulighed for overvågning, herunder, blodprøvetagning, medicinindtagelse og blodtryk overvågning, der skal gennemføres med minimale forstyrrelser og / eller stress til dyret 1. Talrige efterforskere har skrevet protokoller og har særlige metoder, som deres laboratorium udfører den kirurgiske procedure 5-8. Videoen og illustrationer vise, hvad vores laboratorium har fundet til at være en succes med hensyn til collum arteriel og venøs kateterisation procedure.
Rotter er almindeligt anvendt i laboratoriet for en lang række videnskabelige undersøgelser på grund af deres lille størrelse og bekvemmelighed i håndtering. Der er flere steder, hvor en kroniskkateter kan placeres inden for et dyr, herunder halsfedt, abdominal aorta, halspulsåren og arteria femoralis, for at nævne nogle få. Rotten femorale placering for kronisk kateterisation resulterer i øget længde af kateter åbenheden og havde den hurtigste genopretning af præ-kirurgisk dyrets vægt i forhold til andre kateter steder 9.
Talrige efterforskere har brugt indlagte katetre til akut såvel som kronisk blodprøvetagning 1-5,11-13. I mange undersøgelser flere blodet trækker kræves af et dyr og eksterne kanylering / kateterisation er en metode, der er fordelagtigt på grund af sin ikke-traumatisk art Derudover kan det gøres, mens dyret er ved bevidsthed, er således ikke begrænset af virkningerne af anæstesi og også dyret kan frit bevæge 1,10. Den bedste metode til at skaffe blodprøver og måling af stresshormoner i gnavere har været længe debatteret 6,13. Med hensyn til farmakokinetiske Studies, kateterisation af forskningen dyret tillader gentagne blodprøver med minimal tilbageholdenhed, når du bruger en kronisk implanteret kateter system. Desuden har undersøgelser vist reduceret basal koncentrationer af adrenalin, noradrenalin og dopamin i plasma af frit bevægelige rotter (jugularis kateter) sammenlignet med dyr, der er blevet håndteret (30 sekunder) og eller behersket (5 minutter) 14. En yderligere metode til at skelne stigninger i stress er ved at måle plasma corticosteron niveauer. Tidligere var det foreslået, at selv efter tre til fire dage af kirurgiske opsving gange, at plasma corticosteron niveauet var forhøjet i den kroniske kanylerede rotte 15. Imidlertid har de seneste forbedringer i metode fastslået, at der ikke er nogen forskel i basal plasma corticosteron niveauer i jugularis venen kanylerede rotter i forhold til uncannulated rotter 16. Desuden HPLC metode til corticosteron analyse viste, at corticosteren niveauer er forhøjede ved tilbageholdenhed stress, men stabil efter jugularis kateterisation 16.
En yderligere brug af kroniske kateterisation er måling af blodtryk og hjertefrekvens hos gnavere. Der er flere metoder, der er brugt til at måle blodtryk og puls hos rotter, disse omfatter den ikke-invasive hale manchet metoder, radiotelemetry procedurer og direkte iboende katetre. Hver metode har sine fordele og ulemper, som er beskrevet i detaljer i andre publikationer. Iboende væskefyldte katetre kan implanteres i flere arterier i rotten. Det femorale arterie er kun en arterie, der kan bruges til denne foranstaltning. For blodtryk / puls foranstaltninger, er den distale ende af kateteret er tilsluttet en kalibreret tryktransducer. Kateteret kan være anbragt i en beskyttende foråret, der er forbundet til en drejelig at tillade fri bevægelighed for dyret, eller fastgjort til en knap surgitisk implanteret til dyret. Indlagte katetre har den fordel at minimere langvarig stress på dyret 17,18. Hertil kommer, at materialerne er billige, er kalibrering nemt for pres foranstaltninger og vedvarende langsigtede foranstaltninger kan opnås under forhold med relativ lav belastning for mange uge 19. Vi ville være forkert, hvis vi ikke nævne, at der er ulemper til denne teknik, herunder, det er en kirurgisk invasiv teknik, er vedligeholdelsen af kateteret nødvendige for at opretholde passage, skader på arterien på grund af implantation af kateter og potentiale for infektion at nævne nogle få.
For kronisk foranstaltninger blodtryk direkte optagelser fra kronisk-implanterede arterielle katetre er mere teknisk udfordrende, men er mere nøjagtige og kan ske løbende uden at forstyrre dyrene. Hale-manchet målinger er mindre nøjagtige, men de ikke kræver operation og kan også gentageed. Hale-manchet metoder kræver håndtering samt opvarmning af dyret til at spile halen fartøjer for at lette påvisning af puls 20. Håndtering og den ekstra varme stress kan påvirke blodtrykket målinger, og dermed ikke giver helt præcise foranstaltninger. Hertil kommer, at de ikke-direkte hale-manchet metoden ikke tillader nem samtidige blodprøver eller Drug Administration.
En yderligere metode, som direkte mål kan opnås, er ved hjælp af telemetri metode. Telemetri giver mulighed for høj kvalitet optagelser af blodtrykket (og andre foranstaltninger) uafbrudt i længere tid i bevidst frit at flytte dyr uden begrænsninger eller anæstetika 18. Men telemetri-enheder, mens ideal er meget dyre. Sammenlignet med telemetri, kateterisation fordele kan nævnes: nedsat "setup" og driftsomkostninger, evnen til let administrere medicin og nemt tage blodprøver i bevidst frit bevægelige dyr. Den administreres afion af narkotika og stoffer, og få blodprøver fra den forskning, dyret kan gøres mens minimalt forstyrrende dyret, og dermed minimere stress til dyret og giver mulighed for en mere nøjagtig måling.
The authors have nothing to disclose.
Forfatterne ønsker at takke Dr. Andrew King, ph.d. og Katrina King for bidrag af illustrationerne. NIH tilskud: R00HL087927.
Name | Tipo | Company | Catalog Number |
Arterial Catheter | Consumable | SAI Infusion | RFA-01 |
Venous Catheter | Consumable | Scientific Commodities, Inc. | BB518-20 & BB31785-V/2 |
27g 1/2″ Blunt Needle | Equipment | Integrated Dispensing Solutions, Inc. | 9991113 |
23g 1/2″ Blunt Needle | Equipment | Integrated Dispensing Solutions, Inc. | 9991109 |
PowerLab/8SP | Equipment | ADInstruments | ML765 |
Quad Bridge | Equipment | ADInstruments | ML118 |
LabChart 7.2 | Software | ADInstruments | |
BP Transducer with stopcock & Cable | Equipment | ADInstruments | MLT844 |
Single Channel Swivel | Equipment | Instech | 375/22PS |
Single Axis-Counter Balance Swivel Mount | Equipment | Instech | CM375BP |
Covance Infusion Harness | Equipment | Instech | CIH105 |
Table Top Isoflurane Anesthesia Unit | Equipment | Protech International, Inc. | 61020 |
Rodent Anesthesia Mask | Equipment | Protech International, Inc. | RAM-02 |
Rodent Induction Chamber | Equipment | Protech International, Inc. | RIC-01 |
Anesthesia Gas Filter Canister | Equipment | Protech International, Inc. | 80120 |
Tabletop Laminar Flow Hood | Equipment | Sentry Air Systems, Inc. | SS-200-WSL |
Oster Golden A5 | Equipment | Oster Professional Products | 78005-140 |
Fiber Optic Light with Dual Gooseneck Guide | Equipment | LW Scientific, Inc. | ILL-1502-DGG1 |
Deltaphase Isothermal Pad | Equipment | BrainTree Scientific | 39DP |
Cotton-Tipped Applicators | Consumable | Solon Manufacturing Company | 36200 |
Gauze Sponges 2″x2″ | Consumable | Kendall Curity | 2146 |
5-0 Nylon Suture | Consumable | Ethicon | 661G |
4-0 Silk Suture | Consumable | Deknatel | 8-S, 136075-0208 |
Tissue Adhesive | Consumable | 3M | 1469SB |
Splinter & Fixation Forceps | Equipment | George Tiemann & Company | 160-55 |
Student Tissue Forceps | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 91121-12 |
Micro Forceps/Bracken Forceps | Equipment | George Tiemann & Company | 10-1942 |
Extra Fine Graefe Forceps | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 11152-10 |
Olsen-Hegar Needle Holder | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 12002-12 |
Student Halsted-Mosquito Hemostat | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 91308-12 |
Rochester Pean Forcep | Equipment | Biomedical Research Instruments, Inc. | 31-1640 |
Student Surgical Scissors | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 91402-12 |
Dumont Forceps | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 11251-35 |
Micro Dissecting Scissors | Equipment | George Tiemann & Company | 160-210 |
Strabismus Scissors | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 14075-11 |
Hartman Hemostat | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 13003-10 |
Tissue Scissors | Equipment | George Tiemann & Company | 160-150 |
Retractor | Equipment | Custom Made |